氡对HBE细胞氧化损伤的研究.PDF

第 31 卷 第 2 期 辐 射 研 究 与 辐 射 工 艺 学 报 Vol.31, No.2 2013 年 4 月 J. Radiat. Res. Radiat. Process. April 2013 氡对 HBE 细胞氧化损伤的研究 刘 星 1 聂继华 1 陈志海 1 金洹宇 1 陈 秋 2 周新文 2 焦 旸 2 童 建 1 安 艳 1 1 （苏州大学公共卫生学院 苏州 215123 ） 2 （苏州大学放射医学与防护学院 苏州 215123 ） 摘要 探讨不同浓度氡对永生化人支气管上皮细胞（HBE ）氧化损伤的影响。体外培养HBE 细胞，在氡浓度 3 一定的条件下以不同染毒时间（20 000 Bq/m ，10min 、20 min 、40 min ）染毒HBE 细胞，检测氡对 HBE 细胞 活性氧（ROS ）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA ）的含量的影响，同时通过单细胞凝胶电泳（SCGE ） 检测细胞 DNA 链断裂情况。结果表明： 随染毒时间延长，MDA 和 ROS 含量明显上升（p 0.05 ），SOD 活力 明显下降（p 0.05 ），SCGE 研究发现，各组 HBE 细胞 Olive 尾距随染毒时间延长显著增加，且均呈现明显的 剂量反应关系。氡可诱导 HBE 细胞产生大量自由基造成 DNA 损伤，从而对 HBE 细胞产生毒效应。 关键词 氡，HBE 细胞，氧化应激，DNA 损伤 中图分类号 R114 ，R818 氡普遍存在于自然环境中。人类天然辐射剂量 试剂盒（Cell Counting Kit-8，CCK-8 ）（Dojindo 公 [1] 。氡及其子 中氡及其子体所占比例约为 50% 以上 司）；BCA 蛋白浓度测定试剂盒（碧云天生物技术 体暴露不断积累，其衰变产生的 α粒子在体内引起 研究所）；活性氧检测试剂盒（碧云天生物技术研究 基因组不稳定，从而增加肺癌发生的可能性。本研 所）；超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒（南京建 究采用不同浓度氡染毒，以永生化人支气管上皮细 成生物工程研究所）；微量丙二醛（MDA ）检测试 胞（Human bronchial epithelial cells ，HBE ）为研究 剂盒（南京建成生物工程研究所）。 对象，观察 HBE 细胞的超氧化物歧化酶（Superoxi 1.2 实验方法 dismutase ，SOD ）活力、活性氧（Reactive oxygen species，ROS ）和丙二醛（Malondialdehyde ，MDA ） 1.2.1 细胞培养与染毒方法 HBE 细胞在 5% 的含量以及 DNA 损伤情况，为进一步探讨氡对 CO2 、37℃条件下，常规培养于 DMEM 培养基中（内 DNA 损伤影响提供实验依据。 含 10%FBS）。取处于对数生长期的细胞制备单细胞 5/mL 的密度接种于Transwell 培 悬液，以每孔 1×10 1 实验材料和方法 养皿内，每孔加入 DMEM 培养基 1.5 mL 。待细胞 贴壁 24 h 后，将