理工大常用临床病原学检测2017PPT.ppt

* 免疫学检查又叫血清学检查，它是利用抗体-抗原反应在细菌感染的种类、性质、部位及病人的感染程度进行特异性诊断，包括： 沉淀反应：可溶性抗原与相应抗体相混合，在一定条件下，形成肉眼可见的沉淀物 。应用于如链球菌、肺炎链球菌、鼠疫耶尔森菌的鉴定 凝集反应：颗粒性抗原与相应抗体可发生特异性结合，在一定条件下出现肉眼可见的凝集小块。用于沙门菌、志贺菌、致病性大肠埃希菌、霍乱弧菌、布氏杆菌、流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌及链球菌等的鉴定。 荚膜肿胀试验：常用于肺炎链球菌、流感嗜血杆菌和炭疽芽胞梭菌等检测。 制动试验：主要用于霍乱弧菌的快速鉴定。 3.免疫学检查法 * * 4.分子生物学检查法 应用分子生物学方法进行细菌检测，如部分的核酸杂交技术、聚合酶链反应技术（PCR）及质粒指纹图谱技术，还有逐渐成熟的蛋白质芯片技术及DNA芯片技术。 ---全自动细菌鉴定飞行质谱仪（简单介绍） 二、细菌耐药性检查 常用检测细菌耐药性的方法为： KB法（即纸片扩散法）：根据纸片中所含药物的抑菌环大小来判断。抑菌环越大越敏感。 优点：选药灵活、便宜、一个平皿可测多个药 缺点：影响因素多 MIC法：检测能够抑制被测菌生长的最低药物浓度，MIC值越小越敏感。 优点：操作容易（一次可操作检测多种药物）；敏感株的MIC呈正态分布；已实现自动化等 * 药敏试验折点的建立 1. MIC的分布 2. 药代动力学和药效学 定 MIC的折点 3. 临床疗效和细菌清除率 4. 抑菌圈直径的分布 …定抑菌圈折点 药代动力学和药效学 药代动力学：药物吸收，分布，代谢，排泄 药效学：药物对机体的作用 时间依赖型（％TMIC〕：β－内酰胺类，大环内酯类 浓度依赖型（AUC/MIC比率〕：AGS, FQ 这些参数可用于计算具有最佳药效的给药方案 * 选药原则 主要根据细菌种类和抗生素作用机制选药。选择试验的药物应具有确切的临床疗效，试验药物的体外试验结果可以接受，并且试验药物具有代表性。 预报用药 测试药 菌名 推测其它药物的敏感性 苯唑西林 葡萄球菌 所有β-内酰胺类 四环素 所有（除葡 多西环素，米诺环素 萄球菌和不 动杆菌〕 红霉素 G＋球菌 罗红霉素，克拉霉素，阿奇霉素 克林霉素 所有 林可霉素 测试药 菌名 推测其它药物的敏感性 氨苄西林 肠球菌 青霉素 青霉素G 葡萄球菌 氨苄，美洛，替卡 头孢噻吩 肠杆菌科 拉定，氨苄，克罗 万古霉素s 所有 替考拉宁s 奈啶酸 肠杆菌科 所有FQs 预报用药 报告结果方式 敏感（S） 用常规用量治疗有效 常规用药时达到的平均血药浓度超过细菌的MIC 5倍以上。 耐药（R） 用常规用量治疗不能抑制细菌的生长 MIC高于药物在血、体液中可能达到的浓度 中介 (I) MIC接近血、体液中药物的浓度，治疗反应率低于敏感株 药物生理浓集部位有效 (尿－FQ) 加大用药剂量可能有效 非敏感（NS）：由于没有耐药菌株或耐药菌发生罕见，此分类特指仅有敏感解释标准的分离菌株。 报告结果方式 ESBL筛选和确证 大肠埃希菌 肺炎克雷伯菌 产酸克雷伯菌 奇异变形杆菌 头孢泊肟≤17mm（或MIC≥8ug/ml) 头孢他啶≤22mm（或MIC≥2ug/ml) 头孢噻肟≤27mm（或MIC≥2ug/ml) 头孢曲松≤25mm（或MIC≥2ug/ml) 氨曲南≤27mm（或MIC≥2ug/ml) 头孢泊肟≤22mm（或MIC≥8ug/ml) 头孢他啶≤22mm（或MIC≥2ug/ml) 头孢噻肟≤27mm（或MIC≥2ug/ml) 初筛 初筛 头孢他啶/克拉维酸-头孢他啶 和 头孢噻肟/克拉维酸-头孢噻肟 =抑菌圈直径增大值≥5mm(或MIC减低≥3个倍比稀释度） 判为产ESBL 确证 确证 目前国家规定需监测ESBLs的菌株是：大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、产酸克雷伯菌和奇异变性杆菌。 ESBL解读： （一）ESBLs 阳性（+）： 若实验室采用CLSI M100-S19及之前的标准，则需要将所有青霉素类、头孢菌素类和氨曲南修订为耐药。 当使用当前的解释标准时（采用CLSI M100-S26标准），在报告结果前不再需要常规测试ESBL（即，不再需要将青霉素类、头孢菌素类或氨曲南结果从敏感修正为耐药）。（即检测为敏感即为敏感，耐药即为耐药）。 然而，为了流行病学调查或感染控制目的仍可测试ESBL。 ESBL解读： 氨苄