分析验证方案及要求.pdf

分析方法验证方案及要求 目的：各项目验证方案相对同一，并达到相应要求。 适用范围：适用于起始原料、原料药和制剂的有关物质、异构体、含量、溶出度和残留溶剂 的方法验证。 1. 参考标准及参考文献 参考标准：USP/BP/EP/JP/CP 国标部标/进口注册标准符合说明/其他参考标准/参考文献 等，并分析判断。 2. 有关物质（HPLC） 资料中结果和方案尽量以表格形式列出。 小数位数：所有有关物质百分含量计算过程中保留小数后3 位，最终结果保留小数后2 位。如果样品特别纯，最大杂质也在0.01% 以下，则最终结果保留小数后3 位。（四舍五 入保留双） *每个项目各自始终重点保留好已知杂质（包括起始原料和中间体）、异构体、购买对照 品（包括包装说明书空瓶）、自制对照品和粗品等。 2.1 优化方法 UV 扫描（杂质可用DAD ），确定波长、优化流动相、柱温、样品配制溶剂及浓度和进样 量等。粗品估计样品浓度（限度：限度浓度的对照溶液逢高至少大于LOQ 两倍以上）。模方 法及方法波长不能完全确定时，可以选择双波长进行。 要求：优化流动相跟他每一个条件重复进样两针，写所有试验详细记录，注意问题讨论和结 论。图谱性能报告按有关物质放大比例打印。最后资料体现几个代表性的优化过程及附图。 （几个参考方法列表，你比较优劣，如方法是在USP 等法定或别的基础上优化的，则需有 实验和图谱证明等同性或优越性。并做1-n 批的对比测试，证明结果相当） *原料和制剂报告限度、鉴定限和控制限的算法。原料制剂中降解的未知组分超过鉴定限和 控制限应该排除分析上的问题后着手从工艺、原辅料质量和贮存条件等上下功夫解决。 2.2 耐用性 有专家说考察系统适应性溶液的耐用性即可。建议在专属性前优化方法时就做（破坏试验 之前），以更好的了解方法本身；建议用粗品做：为兼顾到含量的系统适应性溶液的配制， 可以设计系统适应性溶液为“活性成分含量的浓度+有关物质限度的浓度” 。 分别考察流动相的比例变化按相对比例±5% （注意梯度计算方法）、流动相缓冲盐的浓度 按摩尔浓度的±10% ，流动相pH 值变化±0.2 、柱温变化±5°C 、检测波长变化±5nm （如UV 图 半峰宽）比较小则±2nm ）、流速相对值变化±20% （时间和分离度达不到则减小）以及采用三 根柱子不同批号或不同品牌的色谱柱（最好是在精密度时做）进行测定时，仪器色谱行为的 变化，每个条件下按方法的系统适用性溶液（研究时按已知杂质加样品）测试两次（有关物 质耐用性：空白+系统适用性溶液2 针）共6 个数据；含量耐用性：除系统适用性溶液连续 进样5 针，计算RSD ，最后总的RSD 。 要求：A 各杂质峰的拖尾因子与原方法相当，不得大于2.0 （0.5-2.5 ）；各杂质峰的分离度与 原方法比较，不得小于1.5，杂质峰和主峰必须大袋基线分离，各峰含量的RSD 不大于2% （流速和有机相比例变化不考察），保留时间不大于5% （流速和有机相比例变化不考察）。 如达不到要求，特别是分离度，则减小变化幅度，并在质量标准中做严格规定。 B 结果同时关注保留时间和相对保留时间的变化，所有结果以表格形式列出，按有关物质放 大比例尺打印谱图性能报告。资料中附图。 2.3 2.3.1 系统适应性 试验前确定好杂质谱并得到所有杂质样品，并对样品和粗品按面积归一化或自身对照法进行 过粗约测试，初步讨论各杂质限度。质量研究中的系统适用性包括的杂质不仅仅是质量标准 中系统适应性溶液的杂质，包括既定研究的已知杂质。方法验证用同一批小试样品或中试样 品。 空白、杂质定位溶液和样品（建议用粗品，更好的考察杂质情况）供试液：各1 针，杂质单 品浓度要合适，峰高1000-2000mv，以用面积归一化法计算各单品的纯度，样品纯度按面积 归一化或自身对照法计算。 混合溶液：配制杂质（限度浓度或高于限度浓度）+样品（供试液浓度）的混合溶液，进一 针。 要求：A 所有试验连续进行。空白溶液和空白辅料对主峰和杂质峰无干扰，如干扰则优化条 件。梯度每次试验前均做空白溶液 1-2 针。订入质量标准的系统适应性溶液每次试验均做， 进一针。 B 主峰与相邻杂质峰达到基线分离，分离度最好不小于2.0（如1.5-2.0 质量标准系统适应性。 可能要考虑到。并且做耐用性试验可能会达不到要求，则减小变化幅度，订质量标准中提高