第三节核酸的分子结构.ppt

组成核糖体 催化肽键形成在于23SrRNA上 参与tRNA与mRNA的结合 第四节 核酸的理化性质（245页） 大多数DNA为线性分子，分子极不对称，粘度极高，而RNA的粘度较小； 核酸的水解 二. 核酸的酸碱性质 既有磷酸基，又有碱性基团，为两性电解质，通常表现为酸性； 三. 核酸的紫外吸收 四. 核酸的变性、复性及杂交 一、核酸的水解 糖苷键和磷酸二酯键 (一). 酸水解：糖苷键比磷酸二酯键易被酸水解；嘌呤碱的糖苷键比嘧啶碱的糖苷键稳定性差； （二）. 碱水解：RNA的磷酸二酯键易水解，DNA的较稳定； （三）. 酶水解：非特异的磷酸二酯酶： 蛇毒磷酸二酯酶水解DNA（RNA）得5’-核苷酸 牛脾磷酸二酯酶水解DNA（RNA）得3’-核苷酸 ★特异的磷酸二酯酶：核酸酶 （一）酸水解 ★对酸的敏感性：糖苷键＞磷酸酯键 嘌呤糖苷键＞嘧啶糖苷键 ★脱嘌呤： pH1.6，37℃，对水透析 pH2.8，100℃，1h ★脱嘧啶： 98-100%甲酸，175℃，2h 三氟乙酸，155℃，60min（DNA）或80min（RNA） ★利用酸水解可以研究核酸的碱基组成 （二）、?? 碱水解 ★RNA的磷酸酯键对碱敏感 室温，0.3~1mol/L KOH，24h，可将RNA完全水解，得到2’-或3’-核苷酸的混合物。 ★DNA抗碱水解 ★生理意义： DNA更稳定 ，遗传信息。 RNA是DNA的信使，完成任务后迅速降解。 （三）、?? 酶水解 ★非特异的磷酸二酯酶： 蛇毒磷酸二酯酶水解DNA（RNA）得5’-核苷酸 牛脾磷酸二酯酶水解DNA（RNA）得3’-核苷酸 ★特异的磷酸二酯酶：核酸酶 核酸酶的分类 ★底物专一性： 核糖核酸酶 RNase 脱氧核糖核酸酶 DNase ★作用方式： 核酸外切酶（exonuclease)、核酸内切酶 (endonuclease) 单链核酸酶、双链核酸酶、杂链核酸酶 ★磷酸二酯键的断裂方式： 5’-（寡）核苷酸 3’-（寡）核苷酸 二、? 核酸的酸碱性质 核酸的碱基、核苷和核苷酸均能发生两性解离。核苷酸含有磷酸和碱基，为两性电介质，在一定条件下形成兼性离子 DNA等电点 4—4.5 RNA 等电点 2—2.5 组成三股螺旋的DNA单链，一般都由单一的嘌呤碱基（A和G）或单一的嘧啶碱基（C和T）所组成 结构：是在Watson-Crick双螺旋基础上形成的，其中大沟中容纳第三条链形成三股螺旋。在三螺旋DNA中三个碱基配对(Hoogsteen base pairing) 形成三碱基体: T-A-T ，C-G-C。 作用：H-DNA存在于基因调控区和其他重要区域，因而具有重要意义。 （二） DNA的三级结构——超螺旋结构 DNA 的三级结构是指DNA分子（双螺旋）通过扭曲和折叠所形成的特定构象，包括不同二级结构单元间的相互作用、单链与二级结构单元间的相互作用以及DNA的拓扑特征。 超螺旋是DNA三级结构的一种形式。 DNA双螺旋进一步扭曲即成三级结构。 天然DNA有双链DNA（dsDNA）， 有的病毒为单链DNA（ssDNA） 在dsDNA中： 线形分子（大多数） 环状分子（dcDNA）：质粒、线粒体、叶绿体、病毒、细菌 1）共价封闭的环状双螺旋分子 2）超螺旋结构：双螺旋基础上的螺旋化 正超螺旋(positive supercoil):盘绕方向与双螺旋方同相同 负超螺旋(negative supercoil):盘绕方向与双螺旋方向相反 负超螺旋是由于两条链缠绕不足引起的，很容易解链，它的存在对于转录和复制都是必要的 。天然DNA中，大约每100bp上有3-9个负超螺旋。 （三）DNA在真核生物细胞核内的组装 核小体(nucleosome)： 由DNA和组蛋白构成。 DNA：以负超螺旋缠绕在组蛋白上 组蛋白核心：H2B ,H2A ,H3 ,H4 H1组蛋白在核小体之间 核小体的结构： H2A H2B H3 H4 各2分子 H1 1分子 组蛋白八聚体： DNA盘绕八聚体1.６５圈， 共146bp, 中间连接60bp， 每个核小体重复单位约占 DNA 200bp。 DNA双螺旋 核小体，压缩 7× 螺线管，压缩6