第四章-药物的定量分析与分析方法的验证3.ppt

2.GC 第二节 定量分析方法的特点 示例 松节油的含量测定 照气相色谱法(附录Ⅵ E测定) 色谱条件与系统适用性试验 用聚乙二醇(PEG)-20M为固定相，涂布密度为20%；柱温为90°C。理论塔板数按α-蒎烯峰计算应低于1500。 校正因子测定 取正丁醇适量，精密称定，加石油醚(30～60°C)制成每1ml含20mg的溶液，作为内标溶液。另取α-蒎烯对照品约30mg，精密称定，置10ml棕色量瓶中，精密加入内标溶液2ml，加石油醚(30～60°C)至刻度，摇匀，吸取1μl注入气相色谱仪，计算校正因子。 第二节 定量分析方法的特点 测定法 取本品约35mg，精密称定，置10ml棕色量瓶中，精密加入内标溶液2ml，用石油醚(30～60°C)溶解并稀释至刻度，摇匀，吸取1μl注入气相色谱仪，测定，即得。 本品含α-蒎烯(C10H16)不得少于70%。 第三节 药品分析方法的验证 药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则 药物稳定性试验指导原则 缓释、控释制剂指导原则 微囊、微球与脂质体制剂指导原则 细菌内毒素检查法应用指导原则 目的： 证明所采用的分析方法适合于相应的检测要求 效能指标： 评价分析方法的尺度 效能指标包括: 精密度, 准确度, 检测限,定量限,选择性, 线性与范围, 耐用性 第三节 药品分析方法的验证 一、准确度（accuracy） 系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度。 (一)含量测定方法 回收率(Recovery) 回收试验 加样回收试验 3×3，至少9个测定结果 第三节 药品分析方法的验证 二、精密度(Precision) 系指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之接近的程度。 表示：偏差(d)、标准偏差(s),、 相对标准偏差(RSD) 重复性: 同一实验室,同一人多次测定的精密度 中间精密度: 同一实验室，不同人，不同仪器测定的精密度 重现性: 不同实验室，不同人测定的精密度 第三节 药品分析方法的验证 三、专属性(Specificity) 指有其他成分（杂质、降解物、辅料等）可能存在情况下采用的方法能准确测定出被测物的特性。 目视法 信噪比法 S/N=3 四、检测限(Limit of Detection, LOD) 药物能被检出的最低浓度(μg/ml) 五、定量限(Limit of Quantitation, LOQ) 药物能被定量测定的最低浓度(μg/ml) 信噪比法 S/N=10 第四章药物定量分析与分析方法验证 药物分析教研室 Contents 定量分析样品的前处理方法 1 定量分析方法的特点 2 药物分析方法的验证 3 生物样品分析方法的基本要求 4 第一节 定量分析样品的前处理方法 Pretreatment of sample used in quantitative analysis 一、概述 含卤素药物 C—X 乙烯型卤和芳卤 烯丙型卤和苄卤 卤代烷型 卤素活泼性 I＞Br＞Cl＞F 分子中所含卤原子的个数越多，活泼性越强；同一碳上含多个卤原子或一个苯环上含多个卤原子时，活泼性增强更加明显 三氯叔丁醇 六氯对二甲苯 泛影酸 碘他拉酸 第一节 定量分析样品的前处理方法 第一节 定量分析样品的前处理方法 不经有机破坏 经有机破坏 直接测定 配位滴定法 氧化还原滴定法 水解后测定 碱水解 酸水解 经还原分解后测定 湿法破坏——凯氏定氮法 干法破坏 高温灼烧法 氧瓶燃烧法 第一节 定量分析样品的前处理方法 (一)、直接测定法 葡萄糖酸钙 EDTA配位滴定 富马酸亚铁 邻二氮菲-硫酸铈滴定 葡萄酸锑钠 间接碘量法 (二)、经水解后测定法 适用范围：金属原子不直接于碳原子相连或某些C-M键结合不牢固的有机金属药物。 第一节 定量分析样品的前处理方法 三、经有机破坏的分析方法 含氮、硫、硫柳汞、氯化钠的生物制品、含氮有机合成药物测定的前处理和生物制品中金属元素测定时生物基质的去除。 H2SO4-HNO3 H2SO4-HClO4 H2SO4-H2SO4 HNO3-KMnO4 分解剂/消化剂 辅助分解剂 ——凯氏定氮法 测定含有氨基和酰胺结构的药物结构 (一)湿法破坏 第一节 定量分析样品的前处理方法 原 理 将含氮药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热，药物分子中有机结构被“消化”成CO2和H2O，有机结合的氮转化为无机氮，与过量的硫酸结合为硫酸氢铵和硫酸铵，经碱化后释放出氨气，随水蒸气馏出，用硼酸溶液或定量的酸滴定液吸收后，再用酸或碱滴定液滴定。 常量法——含氮量 25～30