荧光定量pcr在动物疫病检测中的应用PPT.ppt

PCR扩增反应 1、反应液A 17μl + PCR反应液B 3μl + 待测核酸5μl 25ul反应体系 2、反应条件设置： 50℃ 15分钟，1个循环；95℃ 15分钟，1个循环； 94℃ 15秒→55℃ 45秒（收集荧光），40个循环。 * 产品性能指标 灵敏度为100 copies/ml（1000 copies/ml ） 特异性：与感染部位相同或感染症状相似的其他病原体无交叉反应。 临床试验结果显示，阳性符合率达到98%以上，阴性符合率达到99%以上。 禽流感H5/H7/H9分型三通道实验示例 H5单通道 H5多通道 标本1 标本2 标本3 标本4 标本5 单通道 20.44 24.03 27.21 30.44 34.14 多通道 21.07 24.31 26.96 30.68 33.85 禽流感H5/H7/H9分型三通道实验示例 标本1 标本2 标本3 标本4 标本5 单通道 21.14 24. 80 28.61 31.69 34.94 多通道 21.03 25.74 28.93 32.17 34.77 H7多通道 H7单通道 禽流感H5/H7/H9分型三通道实验示例 标本1 标本2 标本3 标本4 标本5 单通道 21.86 24.79 28.54 31.37 34.82 多通道 22.35 25.07 28.57 31.70 34.63 H9单通道 H9多通道 类别 样品名称 样品编号 　 　 　 　 　 　 　 　 中山达安通检 判定 　 　 普通PCR通用 PRRSV欧洲株（EU PRRSV） 中国分离株1 PRRS样品盘1 Undetermined - 26.79 20.55 Undetermined - Undetermined - Undetermined - 36.30 + + 中国分离株2 PRRS样品盘2 Undetermined - 27.16 12.77 Undetermined - Undetermined - Undetermined - 22.90 + + LV PRRS样品盘3 Undetermined - 26.66 15.83 Undetermined - Undetermined - Undetermined - 24.52 + + 海博莱疫苗 PRRS样品盘4 Undetermined - 26.76 15.20 Undetermined - Undetermined - Undetermined - 28.64 + + PRRSV美洲经典株（NA PRRSV） HB-2 PRRS样品盘5 26.31 + 26.55 / 24.65 + 27.57 + 24.55 + 29.87 + + CH-1A PRRS样品盘6 21.93 + 27.95 / 20.06 + 19.49 + 16.76 + 19.71 + + VR2332 PRRS样品盘7 23.65 + 27.42 / 20.26 + 21.13 + 17.04 + 21.53 + + 其他病毒培养液 BVDV PRRS样品盘8 Undetermined - 26.05 / Undetermined - Undetermined - Undetermined - 39.82 - - JEV PRRS样品盘9 Undetermined - 27.61 / Undetermined - Undetermined - Undetermined - - - - EAV PRRS样品盘10 Undetermined - 27.29 / Undetermined - Undetermined - Undetermined - - - - PRRSV美洲经典株（NA PRRSV） 临床样品猪肺脏、淋巴结混样 PRRS样品盘11 23.64 + 28.42 / 25.93 + 21.97 + 18.79 + / / / PRRSV美洲变异（HP PRRSV） 临床样品猪肺脏、淋巴结混样 PRRS样品盘12 24.94 - Undetermined / Undetermined - 44.05 + 28.07 + / / / PRRSV美洲变异（HP PRRSV） 2011年分离株 PRRS样品盘13 16.95 + Undetermined / 24.32 + 25.87 + 16.56 + 21.42 + + 2012年分离株 PRRS样品盘14 14.26 + Unde