逆流液相色谱-副本PPT.ppt

第二组;;原理特征;用很长的软管绕制成的色谱柱内不加入任何固态支撑体或填料。用此体系的上层或下层作为色谱过程的固定相，首先将其注满管柱内，然后让此管柱作特定的旋转运动，用由此形成的离心力场来支撑住柱内的液态相。; 根据被分离混合物的理化特性.选择某一种有机/水两相溶剂体系或双水相溶剂体系，此体系可以是二元的或多元的。;;旋转小室逆流色谱（RLCC）;;离心逆流色谱法：仪器工作的时分离柱要绕中心轴在设备中高速转动，因为高速旋转产生的离心力可使两相剧烈地反复混合分层，实现快速高效的分离。 ; 非行星式逆流色谱仪：主要包括分离柱室螺旋式和非螺旋管式，主要是匣盒式离心逆流色谱仪。 行星式逆流色谱仪：分离柱几乎全是利用聚四氟乙烯管绕成的螺旋线圈。; 高速逆流色谱法（HSCCC）;高速逆流色谱;高速逆流色谱技术的优点;;例1低速逆流色谱分离制备栀子黄色素中的藏花素;正交实验; 固定相保留率越高对分离越有利，因此最佳转速选为50r／min。流动相的流速不但影响分离时间，而且也会对分离度产生一定的影响。在其他参数相同的条件下，流速越大，分离时间越短，但是固定相保留率越小，分离度就越小。因此流速选择要尽可能保证固定相保留率和分离度综合实际分离情况，本实验最佳流速选为5 mL／ min。; 例2高速逆流色谱纯化白藜芦醇的研究;虎杖中白藜芦的提取 采用有机溶剂回流提取和超声波强化提取法。其中超声波强化提取法时间很短，可以大大缩短生产周期，且不需加热，节能高效;得出结论本实验最佳工艺条件： 白藜芦醇除杂：乙醚沉淀法 溶剂体系：氯仿：甲醇：水=4:3:2 转速850r/min 流速2ml/min 进样量5ml提取液;例3夏天无生物碱的高速逆流色谱分离纯化;样品的制备;两相溶剂系统及样品溶液的制备;分离及鉴定 HSCCC分离过程固定相以9 mL／min流速注满高速逆流色谱仪的螺旋管，转速为800 r／min,样品注入进样圈(常规HSCCC二次分离过程需溶剂系统平衡后进样)，同时流动相以2 mL／min流速泵入。开启检测器和记录仪，检测波长为254 nm，根据色谱图收集各色谱峰组分。 HPLC分析及结构鉴定夏天无生??总碱和高速逆流色谱分离各组分用HPLC分析。WatersC18色谱柱,检测波长为280 nm；流动相为乙腈-乙酸／乙酸钠缓冲溶液(70：30，V／V，pH 5.0)，流速1.0mL／min，进样量10μL。;溶剂的选择; 用降低保留酸碱浓度的方法，取得了较为满意的分离效果(如图)。取夏天无生物碱3.0g，采用溶剂系统正己烷·乙酸乙酯-甲醇-水(5:5:2:8,V／V)，上相加5 mmol／L三乙胺，下相加5 mmol／L浓HCl)进行分离.在358～484min得到的3比枯枯灵和化合物4四氢巴马亭的组成的混合物762 mg.;结论：溶剂系统正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(1:0.8:1.1:1v／v)的分配系数大小适合分离;例4高速逆流色谱分离纯化防风中升麻素苷和5-D-甲基维斯阿米醇苷;样品的制备 防风根经45℃烘干至恒重粉碎，过0.9mm孔径筛。取100 g防风粉末用500 mL甲醇室温浸提过夜(12 h)，过滤，重复用400 mL甲醇提取滤渣2次(每次8 h)，合并提取液，减压蒸馏，得浸膏5.2g，放置冰箱内备用。;讨论溶剂系统的选择;结论与展望;参考文献;