测定桑叶中DNJ的含量毕业设计.doc

目录 摘要 关键字 1 前言 1.1DNJ简介 1.2HPLC法简介 1.3国内外研究动态 1.4DNJ的作用和研究意义 2 材料与仪器 2.1材料 2.2设备和仪器 2.3试剂 3方法与步骤 3.1桑叶样品的制备 3.2DNJ标准液的配制 3.3DNJ的衍生化 3.4高效液相色谱测定 3.5精密度实验 3.6稳定性实验 3.7重现性实验 3.8回收率实验 4 结果 4.1标样高效液相图谱 4.2样品高效液相色谱 4.3标准曲线的制备 4.4精密度实验结果 4.5稳定性实验结果 4.6重现性实验结果 4.7回收率实验结果 5 讨论 6 结论 参考文献 致谢 应用HPLC测定桑叶中DNJ的含量 学 生：章珍亭 指导老师：唐忠海讲师 （湖南农业大学东方科技学院 长沙 410128） 摘要：本实验以桑叶为材料，以0.05mol/LHCl为溶剂提取桑叶中的1-脱氧野尻霉素，并用芴基氯甲酸甲酯（FMOC-Cl）为衍化剂，在PH8.5的硼酸盐缓冲液中进行衍生化反应，生成具有紫外吸收的DNJ-FMOC的络合物，再用高效液相色谱-紫外检测法对其分离测定。通过精密度，稳定性，重复性试验，回收率来确定桑叶中DNJ的含量。结果表明,反应产物的色谱图分离效果良好DNJ-FMOC的峰面积与DNJ浓度呈高度正相关关系,加样回收率平均为101.4%。精密度试验、稳定性试验、重现性试验、回收率试验表明,该方法稳定可靠,可以作为测定桑叶中DNJ含量的有效方法。 关键词：高效液相色谱；1-脱氧野尻霉素；精密度；稳定性；重复性；回收率 Determination of DNJ in Morus alba L.leaves by HPLC Student:Zhang Zhenting Tutor:Tang Zhonghai (Orient Science and Technology College of Hnnan Agricultural University,Changsha 410128,China) Abstract: In this experiment, 1-deoxynojirimycin(DNJ) in the mulberry leaf powderwas extracted with 0.05mol/LHCl,then itwas derived by fluorenyl methyl(FMOC)in pH 8.5 borate buffer solution . DNJ-FMOC came into being complex compound, which can be detected by ultraviolet,We separated and detected it by UV-HPLC.The result indicated that the product was separated entirely.There are the most positive relevance between the peak area of DNJ-FMOC and the concentration of DNJ.The average recovery ratio of adding sample is 101.4%. The precision experiment,stability experiment,repeatability experiment and recovery rate experiment showed that the method is credible,so it can be used as an efficient method to detect DNJ content in the mulberry. Key words: High Performance Liquid Chromatography; 1-Deoxynojirimycin；precision; Stability; repeatability; recovery rate 1前言: 1.1DNJ简介 DNJ(1-脱氧野尻霉素)是一种哌啶生物碱，其化学名称是3,4,5-三羟基-2-羟甲基四氢吡啶Deoxynojirimycin的缩写[3]。分子式是C6H13NO4，分子量为163[4]。现代药理研究表明，桑叶中的多羟基生物碱类成分具有显著的降血糖作用，其中1-脱氧野尻霉素(1-deoxynojirmycin,DNJ)是最有潜力的一种糖苷酶抑制剂[5]，通过抑制酶分解淀粉和糖，并阻止葡萄糖的吸收