微生物取样检验操作规范.pdf

**************公司检测中心第三层次文件 标题: 文件编码 JCZX-C-037 微生物取样、检验操作规范 发布实施 2006年12月01日 1取样 1.1取样方法 1.1.1成品：小包装必须取原包装，对大块冷冻食品，应从几个不同 部位用灭菌工具取样，使之有充分的代表性，在将样品送达实验室 前，要始终保持样品处于冷冻状态，样品一旦融化，不可使其再冻， 保持冷却即可。 1.1.2生产过程中的半成品：取样应划分检验批次，注意同批次产品 质量的均一性，取样过程必须保证产品的代表性不被人为的破坏。 1.1.3环境空气：取样时采取沉降法，在固定地点——一般在车间的 九个不同方位。分别放上经过有效灭菌的九个营养琼脂平板，平板 距离地面一米高度。打开平皿盖。暴露于空气中5分钟，盖上盖后 置于37°C 恒温培养箱中培养24小时。利用换算公式，计算出生产 车间每立方米空气的含菌量。 1.1.4加工设备及工器具：取样采用脱脂棉棒涂抹法，有效灭菌的棉 试子在其表面涂抹，来回2—3次，然后，立即投入到10毫升灭菌 生理盐水中，充分均质（摇匀）30秒后，作样品原液备查。 1.1.5人手：取样采用棉试子涂抹法。涂抹法一般不定面积涂抹法— —即用棉试子整个手来回涂抹2—3次，然后涂于甘露醇平皿上检验 金黄色葡萄球菌。送回实验室37°C， 48小时培养。 第 1 页 共 4 页 **************公司检测中心第三层次文件 标题: 文件编码 JCZX-C-037 微生物取样、检验操作规范 发布实施 2006年12月01日 1.1.6水样：采样前，将取样容器进行有效灭菌。自来水取样，先用 酒精灯将水龙头灼烧消毒，然后水龙头完全打开放水5-10min后进 行取样，浸烫水、预冷水及消毒水在水面下10-20cm 处取样 1.2取样要求： 1.2.1取样必须遵循无菌操作程序，防止一切可能的外来污染，每取 完一份样品，应更换新的取样用具或将用过的用具迅速消毒后，再 取一份样品，以免交叉污染。 1.2.2从取样至开始检验的全过程中，应采取必要的措施防止样品中 固有的微生物数量和生长能力发生变化。 1.2.3所取样要有代表性，成品取样必须是随机取样，可利用随机取 样表或其他适当方法进行。 1.3样品标记 1.3.1所有样品包装物或取样容器上要有与样品一致的标记，标记上 注明样品名称、规格、数量、日期等，标记要注意其牢固性，保证 不被擦掉或脱色。 1.4样品的保存 1.4.1样品取回来，一般应及时进行检验，如不能及时检验要存放在 妥善的地方，冷冻样品应存放在-15℃以下的冰箱中，冰鲜品及加工 环节的器具样品应存放-5℃~4℃冰箱或冷却库中。 第 2 页 共 4 页 **************公司检测中心第三层次文件 标题: 文件编码 JCZX-C-037 微生物取样、检验操作规范 发布实施 2006年12月01日 1.4.2待检样品存放时间不应超过36小时。 2检验2.1检验样品的制备 2.1.1冷冻样品先使之融化，可在0-4℃融化，时间不超过18小时， 也可在不超过45℃的环境中融化，时间不超过15分钟，放入无菌室。 2.1.2按照程序进入第一道缓冲间换上工作服，口罩、工作帽、拖鞋， 经过第二道缓冲间进入无菌室。 2.1.3先将自己的手部用70%-75%的酒精棉消毒，然后开始制样。 2.1.4包装的样品，应先将包装物表面擦干净，然后用70%-75%的酒 精消毒开启部位及其周围。 2.1.5用灭菌手术剪及镊子打开包装，剪取25G样品于无菌袋中，加 入225ML稀释剂或培养基进行均质（10%稀释）。 2.1.6工器具及加工设备的样液充分摇匀，待检。 2.1.7样品从均质到接种相隔时间不应超过15分钟