2016hl-第223章免疫学检测技术及免疫学防治.ppt

人工主动免疫与被动免疫的比较 牛分支杆菌 Mycobacterium bovis 置于含胆汁的培养基，逐渐增加胆汁的浓度 13年 卡介苗 Bacillus Calmette-Guerin (BCG) 在胆汁中适应性生长，充分减毒成为预防肺结核的疫苗。 流感疫苗制备流程 灭活疫苗与减毒疫苗的比较 区别点 灭活疫苗 减毒活疫苗 制剂特点 死、强毒株 活、弱毒或无毒 接种剂量及次数 较多，2-3次 较少，1次 副作用 较大 较小 保存及有效期 易保存，较稳定 易失效，4℃保存 免疫效果 较差，维持数月至2年 较好，维持3-5年或更长 禁忌 某些过敏体质不易接种 免疫缺陷者及孕妇一般不易接种。 类毒素疫苗 类毒素是用细菌的外毒素经0.3~0.4%甲醛处理制成。如破伤风、百日咳、白喉类毒素疫苗 亚单位疫苗 提取或合成天然微生物某些成分的亚单位（如外壳的特殊蛋白结构）制成的疫苗。如：乙肝疫苗、HPV（宫颈癌）疫苗；细菌荚膜多糖疫苗等。 优点：副作用小、更为安全、稳定 缺点：免疫原性低，需与佐剂合用。 乙肝病毒（HBsAg） HPV病毒（L1蛋白） 2. 磁珠分离法 特点: 简便, 快速, 费用低, 无需特殊设备 3. 利用FCM技术进行细胞分选 4. 抗原肽-MHC分子四聚体技术 （三）单核-吞噬细胞分离 体外：Percoll连续密度梯度离心法 平皿黏附法分离(阳性分选) 体内：斑蝥敷贴法等 （四）免疫细胞的计数 1. T细胞检测 直接计数 间接免疫荧光法 免疫组织化学法、葡萄球菌花环法 微量细胞毒试验 2. B细胞检测 膜表面免疫球蛋白（mIg）检测 间接免疫荧光法 细胞亚群检测　　 二、免疫细胞功能测定 T淋巴细胞功能测定 B淋巴细胞功能测定 NK细胞功能测定 吞噬细胞功能测定 （一）T细胞功能测定 T淋巴细胞增殖试验 T细胞介导的细胞毒试验 T细胞分泌功能测定 流式细胞术对T细胞功能的检测 T细胞功能的体内试验 ：包括接触性超敏反应、移植物抗宿主反应(GVHR)、迟发型超敏反应(DTH) 等 1. T淋巴细胞增殖试验 形态学方法 放射性核素掺入法 MTT法 抗TCRV等位基因片段产物检测法 T PHA 母 形态学测转化率 ConA 增殖 T T T 淋巴细胞增殖实验：放射性核素掺入法 T细胞介导的细胞毒试验 酶联免疫斑点试验 (enzyme-Linked immonospot assay，ELISPOT) 流式细胞术对T细胞功能的检测 T细胞功能的体内试验 迟发型超敏反应(DTH)： 结核菌素反应 （二） B淋巴细胞功能测定 B细胞增殖(转化)试验 溶血空斑形成试验 酶联免疫斑点法(ELISPOT) 溶血空斑实验 酶联免疫斑点试验 (enzyme-Linked immonospot assay，ELISPOT) （三） NK细胞功能试验 放射性核素51Cr、125I-UdR释放法 乳酸脱氢酶释放法 形态学检测 化学发光法 巨噬细胞吞噬功能测定 巨噬细胞胞毒作用测定 中性粒细胞趋化功能测定 中性粒细胞吞噬、杀菌功能测定 ①中性粒细胞噬菌试验 ② 硝基蓝四氮唑 ③化学发光试验 （四）吞噬细胞功能试验 第四节 免疫学检测的临床应用 认识、阐明相关疾病发病机制 诊断、辅助诊断相关疾病 免疫功能检测与监视 科学研究 一、认识、阐明相关疾病发病机制 白细胞中性粒细胞趋化作用 障碍 中 性 粒 细 胞 的 渗 出 过 程 A B C 毛细血管内皮细胞 侵入细菌 附壁 粘着 游出 EC EC 二、诊断、辅助诊断相关疾病 （一）用已知抗体检测未知抗原 检测病原体及其抗原组分 肿瘤抗原的定性、分型、定量与定位 HLA分型、红细胞血型抗原 （二）用已知抗原检测未知抗体 病原特异性抗体 变应原抗体 自身抗体 细胞毒抗体 三、免疫功能检测与监视 体液免疫功能：免疫球蛋白、B细胞数量与功能. 细胞免疫功能：T细胞总数与亚群 、T细胞功能 ①非特异性增殖反应： ②对特异性抗原的T细胞增殖反应 ③细胞介导的细胞毒试验 ④测定T细胞产生的细胞因子 细胞因子（及其受体）和黏附分子水平 非特异性免疫功能 临床病案讨论： 李XX，男，21岁，在校大学生，同性恋，2015年7月就诊为艾滋病可疑？ 主诉：发热伴口腔疼痛20天 现病史：持续发热39.5℃、鹅口疮、腹泻、体重减轻10公斤、反复呼吸道感染。 辅助检查：HIV 抗体阳性、粪便培养霉菌阳性。 请问：此病人要明确诊断还应做什么检测？ 第二十三章 免疫学防治 (Immunological detec