人胃癌bgc鄄823细胞中去甲斑蝥素抑癌作用.pdfVIP

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2009, 36(9): 1114~1121 人胃癌BGC 823 细胞中去甲斑蝥素抑癌作用 机理的蛋白质组学研究* 1) 2) 1) 1) 1) 1) 秋菊 田志华 孙 晟 杨 宁 王 芳 黄凌云 1) 1) 1)** 彭 安 柳惠图 张 伟 (1) 北京师范大学生命科学学院，细胞增殖及调控生物学教育部重点实验室，北京100875； 2) 北京大学临床肿瘤学院， 京肿瘤医院暨 京市肿瘤防治研究所，恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室，北京100036) 摘要 去甲斑蝥素是我国自行研制的抗肿瘤药物，在临床上主要用于消化道肿瘤的治疗 实验表明，去甲斑蝥素可引起人胃 癌BGC-823 细胞发生M 期阻滞及细胞凋亡 进一步利用双向电泳和质谱技术， 选出了去甲斑蝥素抑癌作用相关蛋白 研 究显示，线粒体热休克蛋白CH60、线粒体ATP 合酶d 亚单位、内质网葡萄糖调节蛋白GRP78、线粒体Hsp70 的辅助因子 GRPE1、SH3L3 以及染色质组装因子1 小亚基RBBP4 参与了去甲斑蝥素的抑癌作用 研究提示，去甲斑蝥素可能通过促进 线粒体热休克蛋白及p53 的表达进而激活caspase-3 依赖的凋亡通路，并且去甲斑蝥素在引发内质网协迫之后，可通过抑制 胞外信号调节激酶(extracellular signal regulated kinase, ERK) 的活性促进肿瘤细胞的凋亡 进一步分析了去甲斑蝥素与线粒体 ATP 合酶抑制剂寡霉素A 的联合用药对人胃癌细胞生长的影响，结果表明，联合用药的抑瘤效果比单独用药的抑瘤效果显 著，提示去甲斑蝥素可能通过抑制线粒体ATP 合酶功能抑制BGC-823 生长 上述结果为优化去甲斑蝥素的联合用药方案提 供了新线索 关键词 去甲斑蝥素，M 期阻滞，细胞凋亡，蛋白质组学 学科分类号 Q291 DOI: 10.3724/SP.J.1206.2009.00068 斑蝥素(cantharidin) 是从芫青科南方大斑蝥或 的分子机制提供了新思路 黄黑小斑蝥体内提取出的一种半帖烯毒素，具有较 1 材料和方法 好的抗肿瘤活性 去甲斑蝥素(NCTD)是人工合成 的斑蝥素衍生物，其毒副作用明显降低，可选择性 1援1 材料 地抑制肿瘤细胞生长，并具有抑制肿瘤转移的活 人胃癌细胞BGC-823 京师范大学生命科学 性[1] 已有报道表明，在多种肿瘤细胞系中，去甲 学院保存；DMEM 购自Gibco 公司；胎牛血清购 斑蝥素可导致细胞周期阻断在G2/M 期，并通过线 自北京元亨圣 生物技术研究所；去甲斑蝥素 [2] (norcantharidin，NCTD) 购自北京大学医学部；鼠 粒体凋亡通路诱导细胞凋亡 而这一过程可能与 去甲斑蝥素能够特异性抑制PP2A(蛋白磷酸酶2A) 抗procaspase-3 单抗、鼠抗 caspase-9 单抗、鼠抗 [3] p53 单抗、兔抗 -actin 单抗均购自Santa Cruz 公 和PP 1(蛋白磷酸酶1)的活性有关 ，但其作用的相 关蛋白还有待于进一步阐明 司；鼠p-ERK 单抗购自Cell Signaling Technology 本研究以人胃癌BGC-823 细胞为实验模型， 公司 Oligomycin A 购自Sigma 公司；IPG strip 购 从细胞水平上探讨了去甲斑蝥素对人胃癌细胞增殖