卵黄抗体技术及其医药应用.doc

卵黄抗体技术及其医药应用 张小莺1 郑礼2 1．德国洪堡大学药理研究所。柏林}2．中国医药研究开发中心有限公司，北京，102206 摘要卵黄抗体技术(IgY技术)，IP通过对禽类(鸡)的免疫注射。进而从相应卵黄申获 得高产量的特异性多克隆抗体。正在成为生舳技术领城和医药研究中的新熬点．奉综逮力图 两要简蘑IgY技术的发展背景、理论基础、技术要点及其优势，并重点介绍了IgY技术在医药 学中的研究进展、应用现状．以及前景展望． 奉文讨论了IgY的优点，对动舫权盖的保护，对风滠跨子静人类抗鼠抗体(HAMA)漫宥 变叉反应·无补体系统活性和无弄质性凝纂素。以及系纯发生学的优势．本文蕙蛄了它在尊重 和医药学方面的应用现状和前景t具体包括抗胃肠道痰病、顸防龋齿、抗蛇毒、替代抗生素使 用、抗击生物武器攻击等多方面的科研争应用前景以度新药开发的潜能． 裳羹词制药工程与技术卵黄抗体技术卵黄抗体kY 卵黄抗体技术，简称lgY(imm城oglobnlin yolk)技术，即通过对禽类(鸡)免疫注射，进丽从卵黄中 获得高产熏的特异悭多克瞧抗体，是近年来快速发展起来的生物技零，雀医药领域具有良好的应用 前景． Dr．C．S协妇在1995年首先使用“IgY技术”这一术语．1996年，lgY抗体的生产和廒用被定义为 IgY技术c1]．1996年，欢洲实验方法替换确认中心(Europ骶n Centre for the Validation《Alternati№ Method，ECVAM)推荐使用lgY代来替哺乳动物IgG，以减少由于抗体采集对动椽造成的伤害。如今， 它已是一个世界性的标准化技术． 一、卵黄抗体技术的理论基础 lgY技术的设想可以回溯列1893年德国科学家KIempef一习的经典实验t让母鸩获得免疫力，从蛋 黄中获得相应抗体． 鸟类的免疫系统与哺乳动物差羽较小。鸟类有三种免疫球蛋白tlgA、IgM和lgY．IgY与哺乳动 物IgG在功能和浓度上襁似，但因其基本结构的差募(例如，lgY的DNA序列与哺乳动物的IgE鼹稠 似啪)，被认为是鸟类特有的抗体。在获得舁源性免疫刺激后，鸟俸内会产生相应抗体，这种特舜性抗体 可以经辅郓管从血细胞转运弦鸡蛋，尤其是卵黄部分．通过免疫刺激和鸟娄的被动兔瘦应答，可以获得 具有医药研究与应用价饿的特界性抗体．取决于不弼的实验方法及英敏感性，每只鸡鬣的lgY舍薰为 100～200mg．这种IgY抗体与哺乳动抗体牲质相近，具有较好的热稳定性和酸稳定性． 二、使用lgY技术的优点 近年来动物福利(animal welfare)已受到园人重视，相应立i虫正在不断完善．在蹶学研究中．应尽 可能减步对受试动物的伤害．IgY技术对此有无可比拟的优势．比之予传统的通过动物栗嫩获得抗 体，IgY技术只需要通过收集鸡蛋，提纯卵黄就能获得．该技术还具有经济学优势．每只鸡每年可生产 ·66·  17～359总lgY，其中l％～10％是特异性lgY，其产量相当于牛、羊等大型哺乳动物．这展示了该技术 在免疫性预防和治疗方面的广阔翦景．此夕卜，IgY抗体对风湿因子和类抗鼠抗体(HAMA)没有交叉复 应，不会激活晴乳动物补体系统活圣!E，并且没有异质性凝寨索．诸多研究指出，卵黄抗体较兔抗体对系 统发生学高廑保守的哺乳动物蛋白质或多肤更能产生特异性反应，抗体效果更明显． 三、卵黄抗体技术的主要技术环节 (一)动物饲养 握荐使用单元式笼养蜜验跨．饲养情况痘尽可能减少对动物本性的影响。 相对于蔷通鸡，选蔫sPF鸡(specific pathogen free，无特定病原体)常棠具有特别优势．实验显示． 由于SPF鸡接受各种外源刺激少，其lgY总含璧琢零较低t一旦其免疫系统谣临挑战，反应会更加强 烈，产生出较普通鸡更高的特异性lgY，并能椿除不确定因索对实验的干扰． (二)对鸡的免疫 免疫寝答至少受三个变化因素影响t抗琢(数量、分予量)、免疫佐荆、实验鸩自身(饲粪情况，年龄、 种属等)。舆体而言，抗原剂量能明显影嚷免疫效果和抗体浓度．不陶抗原的最佳免痰剂量应通过具体 实骏获得．一般来说，小抗原可能需要用太剂景，或者与载体(甄基馥)耦合．Erhard等c．]考察了不同 分子纛大小和不同浓度的抗原．以及佐剂对抗俸浓度的影响，发现抗原景在lo～looopg H枣效果最好。 这一结论也键到其他学者公认．不罚佐剂化学特性不同，它假对可能免疫系统产生刺激和到作甩．据 我们的缎验，弗氏完垒佐剂(FCA)仍是最有效的佐剂．然而它的使用也可能对动物维织造成损害．弗 氏非完全佐剂(FlA)的效力较FCA低．如果与适当的胶状悬浮液混合。其剔传用可控制在轻骰范弱内。 因此。开发新的优皇佐剂，既{8毒持如FCA的佐If4效力，又能避免其可能的严重副作用，是一项值得开展 的工作