微生物实验室规范指导原则幻灯.ppt

药品微生物实验室规范指导原则 福建省药品检验所 吴晓玲 2009.11 一、制定目的 二、药品微生物实验室规范涵盖范围三、药品微生物实验室规范要求具体内容 一、制定目的 药品微生物实验室规范指导原则是为了指导药品微生物检验实验室的质量控制。 药品微生物的检验结果受很多因素的影响，如样品中微生物可能分布不均匀、微生物检验方法的误差较大等。因此，在药品微生物检验中，为保证检验结果的可靠性，必须使用经验证的检测方法并严格按照药品微生物实验室规范要求进行试验。 二、药品微生物实验室规范要求涵盖范围 人员 培养基 菌种 实验室的布局和运行 设备 文件 实验记录 结果的判断等。 三、药品微生物实验室规范要求具体内容 1.对人员的要求 1.1从事药品微生物试验工作的人员应具备微生物学或相近专业知识的教育背景。 实验人员应依据所在岗位和职责接受相应的培训。 1.对人员的要求 1.2检验人员必须熟悉相关检测方法、程序、检测目的和结果评价。微生物实验室的管理者其专业技能和经验水平应与他们的职责范围相符。 1.对人员的要求 1.3通过参加内部质量控制、能力验证或使用标准菌株等方法来评估检验人员的能力。当使用一种非经常使用的方法或技术时，有必要在检测前确认微生物检测人员的操作技能。 所有人员的培训、考核内容和结果均应记录归档。 三、药品微生物实验室规范要求具体内容 2.对培养基的要求 培养基是微生物试验的基础，直接影响微生物试验结果。适宜的培养基制备方法、贮藏条件和质量控制试验是提供优质培养基的保证。 2.对培养基的要求 2.1培养基的制备 2.1.1培养基的选择：在制备培养基时，应选择质量符合要求的脱水培养基或单独配方组分进行配制。 2.1.2培养基的配制：准确称量，并要求有一定的精确度。 2.对培养基的要求 2.1.3配制的溶剂：纯化水，特殊情况下，可能需要用去离子水和蒸馏水。 对配制过程作详细记录，包括配制时间、培养基名称、成分、配制数量、质量监控结果等。 2.1培养基的制备 2.1.4 配制培养基所用容器和配套器具： 应洁净，可用纯化水冲洗玻璃器皿以消除清洁剂和外来物质的残留。对热敏感的培养基如糖发酵培养基其分装容器一般应预先进行灭菌。 2.1.5 配制: 脱水型培养基应完全溶解于水中，再行分装与灭菌。若需要加热助溶，应注意不要过度加热，以避免培养基颜色变深。如需要添加其它组分时，加入后应充分混匀。 2.1培养基的制备 2.1.6培养基灭菌:一般采用湿热灭菌技术，特殊培养基可采用薄膜过滤除菌。 采用验证的灭菌程序灭菌, 根据灭菌培养基的特性，进行全面的灭菌程序验证。 2.1培养基的制备 2.1.7培养基的pH测定: 应确定每批培养基灭菌后的pH（冷却至室温25℃测定）。 pH的测定应是高压后的，因为高压后pH会变化一般±0.2，大部分培养基高压后pH比高压前低0.2~ 0.3。若培养基处方中未列出PH 的范围，除非经验证表明培养基的pH 允许的变化范围很宽，否则，PH的范围不能超过规定的±0.2。 2.1培养基的制备 2.1.8制成平板或分装培养基的检查 容器和盖子不得破裂，装量应相同，尽量避免形成汽泡，固体培养基表面不得产生裂缝或涟漪，在冷藏温度下不得形成结晶，不得污染微生物等。应检查和记录批数量、有效期及培养基的无菌检查。 2.对培养基的要求 2.2.培养基的贮藏 2.2.1自配的培养基已验证的条件下贮藏。商品化的成品培养基根据培养基使用说明书上的要求进行保存。在贮藏时自配的培养基应标记名称、批号、配制日期等信息，商品化的成品培养基标签上应标有名称、批号、生产日期、失效期及培养基的有关特性，所采用的保藏和运输条件应使成品培养基最低限度的失去水分并提供机械保护。 2.2.培养基的贮藏 2.2.2培养基灭菌后培养基应避光保存，若要长期保存，应置于密闭容器中以防止水分流失。 培养基灭菌后若储藏在高压灭菌器中，质量可能会受影响，（影响发酵培养基的颜色）一般不提倡这种存放法。琼脂培养基不得在0℃或0℃以下存放，因为冷冻可能破坏凝胶特性。琼脂平板最好现配现用，如置冰箱保存，一般不超过一周，且应密闭包装，若延长保存，保存期需经验证确定。 2.2.培养基的贮藏 培养基灭菌后若储藏在高压灭菌器中，质量可能会受影响，（影响发酵培养基的颜色）一般不提倡这种存放法。琼脂培养基不得在0℃或0℃以下存放，因为冷冻可能破坏凝胶特性。琼脂平板最好现配现用，如置冰箱保存，一般不超过一周，且应密闭包装，若延长保存，保存期需经验证确定 2.对培养基的要求 2.3培养基的使用： 贮藏固体培养基灭菌后的再融化只允许一次，培养基的再融化