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FITC-CSNRDARRC 分子探针的特性及在体标记膀胱癌原位移植瘤靶向性研究 摘要背景：膀胱癌(Bladder cancer）是泌尿系统最常见的恶性肿瘤，居中国男性泌尿生殖系 恶性肿瘤发病率第 1 位,居中国恶性肿瘤发病率第 8 位,占中国恶性肿瘤发病构成的2.5% [1]。75%～85%为浅表性膀胱癌又称非肌肉浸润性膀胱癌[2]。膀胱癌具有治疗后 易复发、复发后恶性程度提高的特点，复发后约 10%的患者最终发展成为肌层浸润性 膀胱癌或转移性膀胱癌。早期的诊断和治疗，对于肿瘤患者良好预后至关重要。近年 来，随着光学分子成像及其探针技术的发展，从分子水平超早期诊断肿瘤、识别微小 肿瘤、发现残余肿瘤成为医学研究的热点。多肽 CSNRDARRC 可以与膀胱肿瘤细胞 进行特异性结合。本实验从 2013 年 7 月至 2014 年 6 月选用 FITC-CSNRDARRC 探针 与膀胱肿瘤细胞结合后进行光学分子成像，以明确该分子探针的体外特性及在体与膀 胱肿瘤细胞结合的靶向性和光学分子影像特征。目的：探讨异硫氰酸荧光素(Fluorescein Isothiocyanate, FITC)-CSNRDARRC 分子探针 的荧光特性及其在体标记膀胱癌原位移植瘤的靶向性。方法：2013 年 7 月 至 2014 年 6 月 体 外 采 用 分 光 光 度 仪 及 分 子 成 像 仪 对 FITC-CSNRDARRC 探针荧光特性及稳定性的检测，确定其在体标记肿瘤的最佳浓度 及成像时间窗。选取 BALB-C 系裸鼠 30 只，分成实验组(移植瘤组 20 只)和对照组（正常组 10 只)，其中对照组中 5 只为结扎双侧输尿管组（A 组)，5 只为未结扎输 尿管组(B 组)。手术方法建立人膀胱癌细胞系 BIU-87 膀胱癌原位移植瘤模型，建模2 周后经尾静脉注射 220μmol/L FITC-CSNRDARRC 分子探针 0.2ml，采用光学分子荧光成像仪分别检测注射 30min 以及 1、2、4、12h 探针的心、肺、肝、脾、双肾、膀 胱及其在膀胱癌原位移植瘤中的分子影像,并测量其平均灰度值。结果：220μmol/L 为 最 佳 注 射 浓 度 ， 循 环 4 小 时 为 最 佳 时 间 窗 , 光 照 和 温 度 对 FITC-CSNRDARRC 探 针 影 响 后 荧 光 信 号 强 度 变 化 不 大 , 经 尾 静 脉 注 射 FITC-CSNRDARRC 后，随着时间的延长，肿瘤组织荧光信号强度逐渐增强，在 4h 时荧光信号强度达到最强，1h、2h、3h、4h、5h、6h、8h、12h 的平均灰度值分别为： 74.22、76.2、80.11、89.38、83.29、85.1、81.22、83.01。正常组织随时间延长荧光信 号逐渐减弱。结论：体外探针的荧光特性受探针浓度的影响，在体标记肿瘤的最佳浓度为 220μmol/L，成像理想时间窗为 4h,体内 FITC-CSNRDARRC 分子探针能明显富集在 肿瘤组织。关键词：异硫氰酸荧光素-CSNRDARRC分子探针；膀胱癌原位移植瘤；靶向性Experimental study on the specialty of the FITC-CSNRDARRC molecular probe and the targeting of orthotopic Xenografts tumor of bladder cancer in vivoAbstractObjective:To investigate the targeting property and correlative factors of the FITC-CSNRDARR C molecular probe labeling orthotopic transplantation tumor of bladder cancer in vivo.Methods:From July 2013 to June 2014,the stability and absorption spectrum of FITC-CSNRD ARRC molecular probe were detected by spectrophotometer and molecular imaging to det ermine the optimum concentration and imaging time window. 30 BALB-C nude mice wer e randomly divided into experimental group(n=20 )and control group(n=10 ).In control gro up ,5 of