glp-1对ages诱导huvecs凋亡保护作用及其机制word论文.docxVIP

缩写词表缩写词英文全称中文全称HUVECSHumanumbilical veinendothelial cells人脐静脉内皮细胞GLP-1Glucagonlikepeptide1胰高血糖素样肤-1AGESAdvancedglycation endproduet高级聚糖终产物PI3KPhosphatidylinositol-3-kinas磷脂酞肌醇-3-激酶AKtSerine/threoninekinase丝氨酸-苏氨酸激酶eNOSEndothelialnitrie oxide synthesis内皮一氧化氮合酶NONitricoxide一氧化氮ASAtherosclerosis动脉粥样硬化ELISAenzymelinked immunosorbentassay酶联吸附免疫实验PIPropidiumiodide碘化丙淀PSPhosphatidylserine磷脂酰丝氨酸PBSphosphatebuffersaline磷酸盐缓冲溶液ROSReactive oxygen species活性氧IGLP-1对AGEs诱导的HUVECs凋亡的保护作用及其机制摘要目的：实验通过培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)，晚期糖基化终末产物（AGEs）诱导体外培养的HUVECs，探讨GLP-1是否干预AGEs诱导内皮细胞凋亡及其机制。研究方法：无菌培养HUVECS，选择生长良好的第3-5代细胞用于实验，实验分为：①正常对照组；②AGEs（200ug/ml）组；③GLP-1（100nmol/l）组；④AGEs（200ug/ml）+GLP-1（100nmol/l）组。分别培养48h后，流式细胞仪检测细胞凋亡率；WesternBlot测定细胞p-Akt、p-eNOS水平；NO试剂盒检测NO浓度。结果:1.流式细胞仪检测结果显示：与对照组相比，AGEs 组显著增加HUVECs的凋亡率（P0.05）；与AGEs+GLP-1 组相比，AGEs组显著增加HUVECs的凋亡率（P0.05）；与对照组相比，GLP-1组的凋亡率无显著差异（P0.05）。2.一氧化氮浓度测定结果显示：与对照组相比，AGEs组细胞培养上清液中产生的NO 的量明显下降（P0.05）；与AGEs+GLP-1组相比，AGEs组细胞培养上清液中产生的NO的量明显下降（P0.05）；与对照组相比，GLP-1组NO的产量无明显改变（P0.05）。3.Western Blot结果示：与对照组相比，AGEs组P-AKt蛋白及P-eNOS蛋白的含量均明显下降（P0.05）；与AGEs +GLP-1 组相比，AGEs组P-AKt蛋白及P-eNOS蛋白的含量均明显下降(p0.05)。结论:1.AGEs可诱导HUVECs细胞凋亡；2.GLP-1可抑制AGEs诱导的HUVECs细胞凋亡；3.GLP-1可通过上调PI3K/ AKt/eNOS通路参与抑制HUVECs细胞凋亡。关键词：胰高血糖素样肽1 晚期糖基化终末产物人脐静脉内皮细胞凋亡IITheEffectandMechanismofGlucagonLikePeptide1onApopotosisofHumanUmbilicalVeinEndothelialCellsbyAdvancedGlycationEndproductsABSTRACTAIMCulturedhumanumbilicalveinendothelialcells(HUVECs)invitro,inducedbyadvanced glycationendproducts(AGEs),tostudywhetherGLP-1interferenceinducedbyadvanced glycationendproductsonendothelialcellapoptosisanditsmechanism.METHODSWeculture HUCVECsinvitro and the3to5generation cellswe reused inourstudy. ellsweredividedintofourgroups:①controlgroup;②AGEs（200ug/ml）group;③GLP-1 (100nmol/l)group;theAGEs(200ug/ml)+GLP-1(100nmol/l)group.Afterincubationfor48h.cellswere collected, westemblotandnitricoxideassaykittodetect theratioofcellapoptosis,proteinlevelsofP-AKtandP-eNOS,andNOconcentrationrespectively.RESULTS1.Flowcytometrysho