gsh耗竭在芹菜素诱导胰腺癌panc-1细胞凋亡中作用word论文.docxVIP

中英文缩略词表缩略词API英文全称apigenin中文全称芹菜素5-FUfluorouracil氟尿嘧啶GEMgemcitabine吉西他滨GSHglutathione谷胱甘肽ELISAenzyme linked immunosorbent assay酶联免疫吸附法DMSODimethyl sulfoxide二甲基亚砜MRP1FCMmultidrugresistanceprotein 1Flow cytometry多药耐药相关蛋白-1流式细胞术FCSFetal calf serum小牛血清PBSPhosphate buffered saline磷酸盐缓冲液PIPropidium iodide碘化丙啶S.DStandand Deviation标准差GSH耗竭在芹菜素诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡中的作用（中文摘要）研究生：帅卫导师：黄秋林目的研究芹菜素(apigenin,API)诱导人胰腺癌PANC-1 细胞凋亡作用，并探讨细胞内谷胱甘肽(glutathione,GSH)耗竭是否参与其诱导细胞凋亡作用。方法不同浓度API(20.0、40.0、80.0 μmol/L)处理体外培养胰腺癌PANC-1 细胞。碘化丙啶(propidiumiodide,PI)染色流式细胞术(flowcytometry,FCM)分析细胞凋亡率；酶联免疫吸附法(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞组蛋白/DNA碎片水平。Hoechst33258 染色荧光显微镜观察细胞凋亡形态改变。分光光度法测定细胞内GSH 含量。结果PI染色FCM结果表明，API(20.0、40.0、80.0 μmol/L)孵育24 h，胰腺癌PANC-1 细胞凋亡率逐次增加(P＜0.05)，呈剂量依赖性。ELISA 测定结果显示，API(20.0、40.0、80.0 μmol/L)显著诱导胰腺癌PANC-1 细胞组蛋白/DNA 碎片增加(P ＜0.05)。Hoechst33258染色荧光显微镜观察发现API(20.0、40.0、80.0 μmol/L)导致胰腺癌PANC-1 细胞的典型凋亡形态学变化，例如细胞核固缩、核碎裂等；同时，细胞凋亡指数以浓度依赖方式增高(P＜0.05)。分光光度法测定结果证明，API(20.0、40.0、80.0μmol/L)作用3h, 胰腺癌PANC-1 细胞内GSH 含量随药物浓度增高逐次降低(P＜0.05)。此外，外源性GSH预孵育能对抗API诱导PANC-1 细胞GSH耗竭作用；并能有效阻断API诱导细胞凋亡率和组蛋白/DNA碎片增加效应。结论1.API具有诱导胰腺癌PANC-1 细胞凋亡作用，呈浓度依耐性。2.API诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡与其耗竭细胞内GSH相关。关键词胰腺癌；芹菜素；细胞凋亡；谷胱甘肽The role ofGSHdepletioninthe apigenin induced apoptosisofhumanpancreaticcancerPANC-1cellsAbstractObjectiveToinvestigatewhetherapigenin(API)inducesapoptosisinhumanpancreatic cancerPANC-1cellsandexplorewhetherthismechanismisinvolvedindepletionof intracellularglutathione (GSH).MethodsHumanpancreaticcancerPANC-1cellsculturedinvitroweretreatedwithvarious concentration(20.0,40.0,80.0μmol/L)ofAPI.Theapoptoticrate(thepercentageof sub-G1cells)wasdeterminedbyflowcytometry(FCM)usingpropidiumiodide(PI) fluorescencestaining.Thehistone/DNAfragmentinpancreaticcancerPANC-1cells wasevaluatedusingenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA).Theapoptotic effectofmorphologywasobservedbyfluorescencemicroscopeusingHoechst33258 staining.Theintracellular level of GSH wasmeasured usingspectrophotometer.ResultsFCMafterPIstainingshowe