i l-27通过促进t h1型免疫应答影响动脉粥样硬化发展进程word论文.docxVIP

目录摘要（Ⅰ）Abstract―――（Ⅱ）前言―――――（1）正文部分1．材料和方法（2）1.1一般资料和实验材料准备（2）1．2方法（4）１.２.１血浆准备及外周血单个核细胞的提取（4）１.２.２细胞培养（5）１.２.３提取总RNA和cDNA合成（5）１.２.４实时荧光定量PCR（6）１.２.５流式细胞术检测Th1和Th2淋巴细胞（7）1．3统计学处理方法（8）2．结果（9）2．1受试者基本资料分析比较（9）2．2冠心病各组和对照组患者血浆中IL-27水平比较（10）2．3IL-27对外周血单个核细胞中IFN-γ等表达的影响（11）2.4IL-27对Th1细胞增殖分化的影响（13）3．讨论（17）参考文献（21）致谢（25）华中科技大学硕士学位论文摘要目的探讨IL-27(interleukin-27)在冠状动脉粥样硬化患者血浆中的水平及升高的IL-27水平对效应T淋巴细胞的作用。方法在此项研究中，分别收集ST段抬高型心肌梗死患者（ST-segment elevation myocardialinfarction STEMI）、非ST段抬高型急性冠脉综合征患者(non-ST-segment elevation acute coronary syndromes NSTE ACS，包括非ST段抬高型心肌梗死和不稳定型心绞痛）、稳定型心绞痛患者（stable angina pectoris SAP）及冠脉造影结果正常的住院患者作为对照组四组的外周血，分离血浆，用ELISA检测血浆中IL-27水平，然后用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（peripheralbloodmononuclearcellsPBMCs），重组人IL-27 体外刺激外周血单个核细胞48小时后，分别用流式细胞术检测Th1，Th2淋巴细胞的水平，用实时定量PCR检测干扰素γ，T-bet，IL-4的表达情况。结果STEMI组血浆中IL-27水平（111.84±49.78pg/ml）和NSTE ACS组（85.03±34.49pg/ml）较正常对照组（49.46±10.86pg/ml）和SAP组（47.80±15.30pg/ml）均明显升高，有统计学差异（P均分别0.05）；STEMI组血浆IL-27水平高于NSTEACS组（P=0.046），SAP组与健康对照组之间血浆IL-27水平均无统计学差异（P值均0.05）；经重组人IL-27刺激48小时后，在STEMI组和NSTE ACS组中，经IL-27刺激组CD4+ IFNγ+T淋巴细胞水平较未刺激组升高，有统计学差异（P0.05）；STEMI刺激组和NSTEACS 刺激组T-bet、干扰素γ水平均较健康对照组显著升高（P均0.05）；但在SAP组与健康对照刺激组之间CD4+IFNγ+T细胞水平，T-bet、干扰素γ均无统计学差异（P0.05）。结论IL-27通过上调Th1淋巴细胞和相关炎症因子作用从而促进急性冠脉综合征发展进程。关键词：动脉粥样硬化免疫系统急性冠脉综合征Th1/Th2淋巴细胞功能失衡白细胞介素-27I-华中科技大学硕士学位论文ABSTRACTObjectiveto determine theIL-27 levelinserumfrompatientswithatherosclerosis and itsrelationship withThelper1 andThelper2 cells.MethodsInthisstudy,peripheral bloodwascollectedfromthreegroupsofpatients,includingST-segmentelevation myocardialinfarction(STEMI),non-ST-segment elevationacutecoronarysyndromes(non-ST-segmentelevationmyocardialinfarctionNSTEMI/unstableanginapectorisUAP) andstableangina pectoris,aswellasfromage-andsex-matchedhealthypeople.IL-27in serumwasquantified byELISA.PBMCswereisolatedandstimulated byrecombinant humanIL-27 for48h.levels ofCD4+IFNγ+TcellsandCD4+IL4+Tcellsweredetectedby flowcytometry. Real-time PCRwasusedto determine geneexpressionofT-bet, IFNγ+,IL-4. Results