microrna-206在肾细胞癌中的功能及分子机制分析word论文.docxVIP

目录英文缩略词表 1中文摘要 2Abstract3前言4实验材料与方法 6结果14结论19讨论20参考文献 22综述27参考文献 32致谢40英文缩略词表英文缩写英文全称中文全称RCCrenal cell carcinoma肾细胞癌miRNAmicroRNA微小核糖核苷酸NTnontumorous tissues非肿瘤组织qRT-PCRquantitative reverse transcriptase PCR实时定量逆转录 PCRsiRNAsmall interfering RNA干扰 RNAODoptical density光密度值FBSfetal bovine serum胎牛血清3’UTR3’ untranslated region3’非编码区DMEMdulbecco’s modified Eagle’smedium达尔伯克（氏）改良伊格尔（氏培养基）PBSphosphate-buffered saline磷酸盐缓冲液TBStris buffered saline三强甲基氨基甲烷 缓冲液SDSsodium dodecyl sulphate十二烷基硫酸钠PAGEpolyacrylamidegel electrophoresis聚丙烯酰胺凝胶电泳EDTAethylenediaminetetraacetic acid乙二胺四乙酸hhour小时minminute分1MicroRNA-206 在肾细胞癌中的功能及分子机制研究硕士研究生：肖海兵 导师：叶章群教授，徐华副教授华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科湖北武汉 430030中文摘要目的：探讨 miR-206 在肾癌细胞系以及肾癌组织中的表达情况；研究 miR-206 对 肾癌细胞系增殖，迁移，侵袭等能力的影响；阐明 miR-206 对肾癌生物学行为影 响的具体机制。方法：运用实时定量 PCR(qRT-PCR)检测肾癌细胞系以及肾癌组织中 miR-206 的 表达；利用 MTS、集落形成实验、EdU 实验，检测 miR-206 对肾癌细胞增殖能 力的影响；利用 Transwell 检测 miR-206 对肾癌细胞迁移，侵袭能力的影响；运 用荧光素酶报告系统以及 Western Blot 检测在肾癌细胞系中 miR-206 可能的靶基 因。结果：MiR-206 在肾癌细胞系以及肾癌组织中表达明显减低，差异有统计学意义（P0.05）；功能获得实验显示过表达 miR-206 可以明显抑制肾癌的增殖、迁移 和侵袭能力；功能抑制实验显示抑制 miR-206 可以明显促进肾癌细胞系的增殖、 迁移和侵袭能力；荧光素酶报告系统以及 Western blot 显示：CDK4, GAK 为 miR- 206 的直接靶基因。结论：MiR-206 作为一个抑癌基因在肾癌的发生发展过程中发挥着明显的抑癌作 用。关键词：肾癌，miR-206， CDK4，GAK，增殖，迁移，侵袭2Study on the Function and the Molecular Mechanism of miR-206 in Renal Cell CarcinomaAbstractMasteral Candidate: Xiao Haibing Supervisor :Prof. Ye Zhangqun, Prof. Xu HuaObjective:To investigate the expression of miR-206 in renal cancer tissues and renal cancer cell lines. To explore the role and molecular mechanism of miR-206 during proliferation migration and invasion of renal cancer.Method:The expression of miR-206 in renal cancer cell lines and renal tissueswere measured by qRT-PCR. Colony-forming Assay, MTS，EdU assay were performed todetect the proliferative ability of miR-206 to renal cancer cell lines. Transwell assay were performed to detect the migration and invasion ability of miR-206.The luciferase reporter assay and western blot were performed to detect w