mtor在活性维生素d3调控thy-1肾炎中的靶点作用以及机制的探讨word论文.docxVIP

中文摘要目的探讨mTOR和活性维生素D3 调控大鼠肾炎过程的相关性以及活性维生素D3的作用靶点。方法将60 只健康的雄性SD大鼠随机分为空白对照组（ControlGroup,CG）、肾炎模型组（Nephritis Group,NG）、肾炎+活性维生素D3干预组(Nephritis+1.25(OH)2D3 Group,NVG)、肾炎+活性维生素D3+雷帕霉素干预组((Nephritis+1.25(OH)2D3+Rapamycin Group,NVRG)，每组15只；给予除CG组外的所有大鼠一次性尾静脉注射单克隆抗Thy-1 抗体（25μL/100g），诱导系膜细胞增生型肾炎模型，造模成功后给予NVG和NVRG组大鼠活性维生素D30.5μg/(只·d)灌胃，同时给予NVRG组大鼠雷帕霉素1mg/（Kg·d）灌胃，直到第21天实验结束；分别于干预后第1、3、7、14、21天每组随机处死3只大鼠，处死的大鼠前一天均收集24h尿液，检测24h 尿蛋白定量，肾组织标本经HE和PAS 染色后确定肾脏病理损害分级，免疫组化法检测肾组织中PCNA、mTOR的表达。结果1.NG组大鼠在注射抗Thy-1抗体后第1天即产生大量尿蛋白，第3天达高峰，至第21天恢复正常；NVG组和NVRG组大鼠在各时间点的尿蛋白水平均显著低于NG组（p0.05），且在第14 天恢复正常。2.NG组大鼠肾组织在注射抗Thy-1抗体后第3天出现病理学改变，第7天病理损害达高峰，第21天恢复正常；NVG和NVRG组大鼠肾组织病理损害在不同时间点均较NG组减轻，且两组之间无显著差异。3.与CG组相比，NG组PCNA、mTOR的表达明显增强（p0.05）；与NG 组相比，NVG组和NVRG组PCNA、mTOR表达明显减少（p0.05），NVG组和NVRG组PCNA、mTOR的表达无显著差异（p＞0.05）。结论1.活性维生素D3可以显著抑制大鼠肾小球系膜细胞的增殖；2.mTOR参与了活性维生素D3对大鼠肾炎的调控过程，可能是活性维生素D3的作用靶点。关键词：活性维生素D3；系膜细胞；mTOR蛋白；PCNA；增殖AbstractPurposeTheaimofthisstudyistoinvestigatethecorrelationbetweenmTORandtheprocedureof 1.25-dihydroxyvitaminD3(1.25(OH)2D3)regulatingThy-1ratnephritis model,andthetargetof 1.25(OH)2D3.Methods 60healthymaleSDratswererandomlydividedintofourgroups:controlgroup(CG),nephritisgroup(NG),Nephritis+1.25(OH)2D3Group(NVG),andNephritis+1.25(OH)2D3+RapamycinGroup (NVRG)，eachgroupcontained15rats.AlltheratsexceptCGgroupweresingleinjectedanti-Thy1monoclonalantibodyviatailintravenousatadoseof25μL/100gtoinducemesangialproliferation glomerulonephritismodel.Afterthenephritisratsweresuccessfullyestablished,theratsinNVGand NVRGgroupwereintervenedby1.25(OH)2D30.5μg/(rat·d)andtheratsinNVRGgroupwereintervenedbyrapamycin1mg/（Kg·d）until the21stday.3 ratsrandomlyselected fromeachgroupwerekilledbyday1,3,7,14and21afterintervention.Thesamplesof24-hoururinewerecollectedbydaybeforekilledto detect24-hoururinaryprotein excretion. The renaltissue sampleswereseparatelystained with hematoxylineosinandPAStodeterminetherenalpathologicalvariation,anddetectedtheexpressionofmTOR, PCNAbyimmunohistochemistry.Results1.Massiveurin