nafld家兔肠道菌群与肠黏膜toll样受体4关系的分析word论文.docxVIP

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2018-02-08 发布于上海
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nafld家兔肠道菌群与肠黏膜toll样受体4关系的分析word论文.docx

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中英文缩略词对照表英文缩写英文全名中文译名16SrDNA16SribosomalDNA gene16S核糖DNA编码基因B.gBifidobacteria group双歧杆菌属E.coliEscherichiacoli大肠埃希菌属G-Gramnegative革兰氏阴性IRInsulin-resistance胰岛素抵抗IODintegralopticaldensity累计光密度LPSLipopolysaccharides脂多糖/内毒素L.gLactobacillus group乳酸杆菌属MSmetabolicsyndrome代谢综合征NF-kBNuclearfactorkB核因子kBNAFLDNonalcohdicfattyliver disease非酒精性脂肪性肝病NAFLNonalcoholicsimple fattyliver非酒精性单纯性脂肪肝NASHNonalcoholic steatohepatitis非酒精性脂肪性肝炎RT-PCRFluorescent real-time polymerase chainreaction实时荧光定量-聚合酶链反应法SIBOsmallintestinal bacterialovergrowth小肠细菌过度生长TLR-4Toll-likereceptor4Toll样受体-4目录摘要…………………………………………………………………………………1ABSTRACT……………………………………………………………………………2前言…………………………………………………………………………………3材料与方法…………………………………………………………………………51.实验材料…………………………………………………………………51.1研究对象………………………………………………………………51.2主要试剂………………………………………………………………51.3标准菌株及培养基：…………………………………………………61.4主要仪器………………………………………………………………62.实验方法…………………………………………………………………62.1实验动物的分组………………………………………………………62.2动物模型的建立………………………………………………………62.3动物的处置及取材……………………………………………………62.4肝脏组织的病理学检查………………………………………………72.5回肠组织免疫组化……………………………………………………72.6粪便细菌基因组DNA的提取及检测…………………………………82.7标准菌株的培养………………………………………………………82.8标准菌株DNA的提取…………………………………………………92.9细菌16SrDNAV3区的PCR扩增……………………………………92.10三种细菌16SrDNA特异性引物的PCR扩增………………………102.11三种标准菌株16SrDNA的PCR扩增………………………………112.12制作标准曲线………………………………………………………112.13待测样品DNA的RT-PCR反应………………………………………123.数据统计与分析…………………………………………………………124.技术路线图………………………………………………………………13结果……………………………………………………………………………14讨论…………………………………………………………………………………17小结…………………………………………………………………………………25致谢…………………………………………………………………………………26参考文献……………………………………………………………………………27综述…………………………………………………………………………………32攻读硕士学位期间发表的学位论文………………………………………………37导师评阅表…………………………………………………………………………38NAFLD家兔肠道菌群与肠黏膜Toll样受体4的关系研究生：王海昆导师：姚萍教授/主任医师摘要目的：研究非酒精性脂肪肝（non-alcoholicfattyliverdisease,NAFLD）家兔肠道菌群的改变，并分析菌群与肠黏膜Toll样受体4（Toll-like receptor4，TLR4）间的关系。方法:14只雄性新西兰家兔随机分成对照组及模型组，对照组给以普通饲料，模型组给以高脂饲料，喂养12周后处死。取肝脏组织行HE染色观察肝脏，取回肠组织行免疫组织化学观察肠黏膜TLR4的定位及表达，取肠内容物行实时荧光定量-聚合酶链反应（RT-PCR）检测肠内容物中大肠杆菌、乳酸杆菌、双歧杆菌拷贝数的变化。用多元线性回归分析肠道