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PDC对高糖环境下INS-1细胞胰岛素分泌、NO产生和IL-1β表达的影响研究生：李永贵【目的】指导教师：李强翔教授摘要观察铁皮石斛多糖对高糖环境下INS-1 细胞胰岛素分泌、一氧化氮(Nitrogenmonoxidum,NO)产生和白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)表达的影响，探讨铁皮石斛多糖降血糖和保护胰岛β细胞的可能机制。【方法】大鼠胰岛β细胞瘤株INS-1细胞用高糖(33.3 mmol/L)孵育48小时诱导损伤，同时用铁皮石斛多糖（100、200 和400μg/mL）处理细胞48小时。实验分为对照组、高糖组、不同剂量铁皮石斛多糖（100、200 和400μg/mL）组和高糖+不同剂量铁皮石斛多糖（100、200 和400μg/mL）组。采用MTT 法和流式细胞术分别检测细胞活力和细胞凋亡，并计算细胞凋亡率。收集细胞培养液，分别采用硝酸还原酶法和放免法检测细胞培养液中NO 和胰岛素的水平。采用实时定量PCR检测细胞中IL-1βmRNA的表达和Western blot 检测细胞中诱导型一氧化氮合酶(Induciblenitricoxide synthase, iNOS)蛋白的表达。【结果】（1）与对照组相比，高糖组INS-l细胞活力显著降低（P0.05），细胞凋亡率显著增加（P0.05），培养液中胰岛素水平明显下降（P0.05），培养液中NO的水平显著增加（P0.05），INS-1 细胞中IL-1β mRNA的表达及iNOS 蛋白表达显著增加（均P0.05）。（2）与对照组相比，铁皮石斛多糖（100、200 和400μg/mL）没有显著影响细胞活力和细胞凋亡（均P＞0.05），也没有影响培养液中NO的水平和iNOS 蛋白表达（均P＞0.05），但是铁皮石斛多糖（100、200和400μg/mL）以浓度依赖的方式增加培养液中胰岛素水平和INS-1细胞中IL-1 β mRNA的表达（均P0.05）。2（3）与高糖组相比，高糖+铁皮石斛（100、200 和400 μg/mL）组INS-l 细胞活力显著增加（P0.05），细胞凋亡率显著降低（P0.05），培养液中胰岛素水平明显增加（P0.05），培养液中NO的水平显著降低（P0.05），INS-1细胞中IL-1β mRNA的表达及iNOS 蛋白表达显著降低（均P0.05）。【结论】铁皮石斛多糖抑制了高糖诱导的大鼠胰岛β细胞瘤株INS-1细胞胰岛素分泌的降低以及NO产生和白介素-1β表达的增加。【关键词】铁皮石斛多糖；高糖；胰岛β细胞；白介素-1β；一氧化氮；诱导型一氧化氮合酶3Effectofpolysaccharideofdendrobiumcandidumoninsulinsecretion,nitrogenmonoxidumproductionandexpressionofinterleukin-1βinratpancreaticisletcelltumorlineINS-1cellsABSTRACTOBJECTIVE:Toinvestigatetheeffectofpolysaccharideofdendrobiumcandidum(PDC)on insulin secretion, nitrogen monoxidumproductionand expression ofinterleukin-1 β in ratpancreaticisletcelltumorlineINS-1cellsandexploretheprobalblemechanismof hypoglycemic effect andprotection ofpancreaticislet beta cellinduced byPDC.METHODS:The ratpancreaticisletcelltumorlineINS-1cellswere treatedwithhighglucosemmol/L)for 48htoinduce theinjury.Meanwhile,INS-1cellsweretreatedwith PDC(100,200and400μg/mL)for48h.Thecellsweredividedintothecontrol group,highglucosegroup,differentconcentrationPDC(100,200and400μg/mL) groupandhighglucose+differentconcentrationPDC(100,200and400μg/mL) group.MTTassaywasusedtodetectthecellviability.Wemeasuredtheratesof apoptosisofINS-1