plag1及igf-2、igf-1r在涎腺多形性腺瘤中的表达及意义word论文.docxVIP

前言涎腺多形性腺瘤是涎腺肿瘤中最常见的一种,占涎腺上皮性肿瘤的50％以上，占全部良性肿瘤的87％以上。多形性腺瘤是源于上皮源性的肿瘤，具有临界瘤的特征，“好种植，易复发”，多次复发可以发生癌变，极少数可发生远处转移[1]。涎腺多形性腺瘤的发生是一个多因子参与的过程，目前主要研究分子水平上潜在的致癌基因、肿瘤抑制基因及其所表达的产物之间的失活与激活，来阐明肿瘤发生的机制[2]。关于人类肿瘤及基因工程小鼠肿瘤的动物模型，证实了PLAGl 基因在涎腺肿瘤形成过程中作用的重要性[3]。在研究涎腺多形性腺瘤发生机制的过程中,发现其常伴有8q12染色体的异常。Kas[4、5]等对8q12 异常的多形性腺瘤构建了8q12断裂点的人工酵母染色体文库,寻找目的基因,结果发现了一个约7.5kb的表达基因。由于这是在多形性腺瘤中发现的新基因,故将其命名为PLAG1。研究表明，PLAG1编码一种核蛋白，属于锌指蛋白家族中的一种。在正常的生理情况下，PLAG1仅在胎儿的肾、肝、肺等脏器组织中表达，在正常成人的心、胎盘、前列腺、脾、睾丸和小肠中均有不同程度表达，而在成人的涎腺、肝、肾、肺、脑、胰腺组织中均未测及该基因的表达，但Queimado研究却认为在正常涎腺组织中，PLAGl亦有低水平的表达[6]。较早的研究还发现，在涎腺良性肿瘤特别是多形性腺瘤中，大约80%可测及该基因的表达，因此PLAG1被认为是一个新的“良性癌基因”（benign oncogene），并预测它有可能是涎腺良、恶性肿瘤鉴别诊断的一个标志。Kas 等研究发现唾液腺多形性腺瘤大部分细胞亚群发生了染色体的重新排列，原因主要是PLAGl在8q12断裂点上经常发生染色体的相互易位。易位的方式主要有3种，其中以“启动子交换”最为常见，即PLAGl基因与白血病抑制因子受体基因、β蛋白基因、延长因子SII基因之间发生染色体的重排[7-9]。其断裂点通常发生在PLAGl基因的5’端的非编码区。染色体易位的结果使它们之间调解控制元件发生了交换,而自身的编码序列得以保留。这种形式在分子机制上称为“启动子交换”，交换的结果使原来在人涎腺组织中失活的PLAGl基因的启动子，被一个通过染色体易位产生的增强启动子所替代，导致了PLAGl的表达上- 3 -调。PLAGl基因表达上调致使PLAGl靶基因脱调节，参与了涎腺肿瘤的发生。研究表明，可能有多个基因具有PLAGI的结合位点，在选择人胰岛素样生长因子2 启动子的研究中发现PLAGI能够结合IGF-2的第3启动子并激活其转录。结果显示在PLAG1高表达的多形性腺瘤中，IGF-2转录物的表达也随之上调;而在PLAG1正常表达的多形性腺瘤和正常涎腺组织中，均未检测到IGF-2转录物的表达上调。由此推测IGF-2可能是PLAG1的靶基因,PLAG1在涎腺肿瘤发生过程可能通过它来起作用[10、11]。而IGF-2的多数生物学活性主要由IGF-1R 来介导。IGF-2与IGF-1R结合后，酪氨酸激酶被激活，使下游底物如胰岛素受体底物(insulinereceptorsubstrates，IRS)、Src同源胶原(srchomologycollagen，shc)等发生磷酸化作用，从而启动磷酯酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol3 kinase，P13K)／蛋白激酶B(pro-teinkinaseB，PKB)或Ras／促分裂原活化蛋白激酶(mitogenactivatedproteinkinase，MAPK)信号通路，将细胞生长增殖信号持续传至细胞核，使细胞周期调节失控，加速细胞从G1期进入S期，促进有丝分裂、细胞表型恶性转化、抗凋亡和诱导血管内皮生长因子(vas-cular endothelial growth factor，VEGF)表达等，促进肿瘤的发生。头颈部所发生的肿瘤，其原发部位和病理类型之多，居全身肿瘤之首，在口腔颌面部肿瘤中大涎腺肿瘤最为常见，而其中又以多形性腺瘤发病率最高。目前国内外对PLAG1、IGF-2、IGF-1R在涎腺多形性腺瘤中的发生、发展过程中的作用已开始有研究但未见结论性研究结果，对在涎腺多形性腺瘤中三者的表达及相互关系的研究目前为止还不多见。本次实验通过实时荧光定量PCR方法，研究PLAG1在涎腺多形性腺瘤的表达水平，以及PLAG1与IGF信号通路中关键蛋白IGF-2、IGF-1R的调控关系，为涎腺多形性腺瘤的早期诊断和预后判断及治疗提供依据。- 4 -1材料1.1标本材料与方法选取2013年6月—2013年11月间贵阳医学院附属医院口腔颌面外科经手术切除病理证实的涎腺多形性腺瘤组织标本20例（肿瘤包括直径均＜4cm）,男性6例，女性14例，中位年龄30岁；口腔恶性肿瘤5例（恶性多形性腺瘤2例，腺样囊性癌1例，口腔鳞状细