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pparγ激动剂对raw264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量及abcg1、lxrα表达影响word论文
PPARγ 激动剂对 RAW264.7 小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量及 ABCG1、LXRα 表达的影响 摘要目的:通过体外培养 RAW264.7 小鼠巨噬细胞,诱导分化建立泡沫细胞模型,然后 测定 PPARγ 激动剂盐酸吡格列酮(pioglitazone hydrochloride,PG)对泡沫细胞内胆 固醇含量及 ABCG1、LXRα 表达的影响,旨在初步探究 PG 对泡沫细胞内胆固醇 含量的调控机制。方法:1.体外培养 RAW264.7 小鼠巨噬细胞,再用 50mg/L ox-LDL 孵育 48h,最后以油 红 O 染色并在光镜下观察细胞形态及变化。2.以不同浓度的 PG(对照组 0μmol/L、实验组 5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)作用泡沫细胞 24h 后,酶比色法测定泡沫细胞内胆固醇酯(Cholesterol Ester,CE)的含量;以 30μmol/L 的 PG 作用泡沫细胞不同时间(对照组 Oh、实 验组 6h、12h、24h、48h)后,酶比色法测定泡沫细胞内 CE 的含量。 3.将诱导分化好的 RAW264.7 小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞,给予不同浓度的 PG(对照组 0μmol/L、实验组 5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L、30μmol/L)作用 24h 后,RT-PCR 和 Western blot 分别测定 ABCG1、LXRα 的基因及蛋白表达水平。结果:(1)体外培养的 RAW264.7 小鼠巨噬细胞半贴壁生长,主要呈类圆形和不规则 多边形,细胞体积较小,含 1-2 个核,有伪足伸出,经 50mg/L ox-LDL 孵育 48h 后,细胞体积显著变大,油红 O 染色胞质内可见大量红染脂滴。(2)与对照组相比,不同浓度的 PG 干预 RAW264.7 小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞 24h 后,细胞内的 CE 含量均显著减少,差异有统计学意义(P0.01);与对照组相比,30μmol/LPG 作用 RAW264.7 小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞 0h、6h、12h、 24h、48h 后,细胞内的 CE 含量均显著减少,差异有统计学意义(P0.01)。(3)与对照组相比,不同浓度 PG 组巨噬细胞 ABCG1、LXRα 的 mRNA 及蛋白 的水平呈浓度依赖性增高,差异有统计学意义(P0.01)。结论:1.PPARγ激动剂可减少RAW264.7小鼠巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量,并呈 浓度和时间依赖性。2.PPARγ激动剂可呈浓度依赖性增加小鼠RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞内 ABCG1、LXRα的mRNA及蛋白表达。 3.PPARγ激动剂减少泡沫细胞内胆固醇酯的含量可能是通过上调ABCG1、LXRα 的表达来实现的,此机制介导的胆固醇流出将成为改善AS的主要途径之一。关键词: 吡格列酮;过氧化物酶受体γ激动剂;泡沫细胞;胆固醇含量;肝X受 体α;三磷酸腺苷转运体G1Eeffect of PPARγ agonist on cholesterol content and the expression of ABCG1、LXRαin RAW264.7 macrophage-derived foam cellAbstractObjective:By cultivating RAW264.7 mice macrophage in vitro, established a model of foam cell, to measue influence of PPARγ agonist pioglitazone hydrochloride (pioglitazone hydrochloride, PG) on foam cell cholesterol content and the expression of ABCG1, LXR alpha.The aim is to preliminary explore the regulatory mechanism of PG in cholesterol in the foam cell.Methods:RAW264.7 mice macrophage cultivated in vitro, incubated by 50 mg/L OX - LDL 48 h , finally oil red O stained and observed cell morphology and change under light microscopy.With different concentrations of pioglitazone hydrochloride that control group 0mol
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