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PTHrP和Ihh在猪脊柱侧凸模型椎体软骨终板中的表达及意义摘要特发性脊柱侧凸（idiopathicscoliosis,IS）是临床上比较常见的一种脊柱三维畸形，尤其好发于儿童及青少年人群，其发病机制复杂，病因尚未明确。软骨内成骨是躯干骨形成的主要方式，椎体上下端的软骨终板在脊柱的纵向生长中发挥关键作用，其成骨的活性与侧凸的发生存在密切关系，受一系列内分泌激素及信号系统的精密调控。近年来研究者们已证实Sox9，FGF，TGF等细胞因子与特发性脊柱侧凸形成的关系，但Ihh-PTHrP信号系统对脊柱侧凸发生发展的影响却鲜见报道。Ihh是印度豪猪蛋白的简称，属于Hedgehog基因家族中的一种亚型，主要在前肥大和肥大软骨期细胞上表达,在软骨内成骨过程中起至关重要的作用；PTHrP基因定位于人第12条染色体，主要由关节处的软内细胞分泌，且作用于下层细胞，抑制肥大细胞凋亡和软骨细胞的进一步分化，是软骨增殖、分化及生长形成过程中的另一个重要因素。本实验通过对猪脊柱侧弯模型凹凸侧椎体软骨终板中Ihh、PTHrP表达水平的研究，推断其两侧软骨内化骨的差异，进一步探索特发性脊柱侧凸发生发展的分子生物学机制。目的:通过免疫组化方法来对Ihh、PTHrP在猪侧弯模型双侧椎体软骨终板中的表达水平及部位进行了解，证实Ihh 与PTHrP 在软骨中表达的相关性，探讨猪脊柱侧凸模型形成的分子生物学机制，为更深入地研究人特发性脊柱侧凸的病因学奠定基础。方法：取2月龄脊柱侧弯幼猪2只，随机编为1号、2号，自代偿弯椎体凸侧、中央及凹侧分别取下软骨终板共计48 份作为实验组，分为A（凸侧）、B（中央）、C（凹2侧）3 组，每组16 份；另取2 月龄正常幼猪2 只，随机编为3、4 号，处死后自T10-L2椎体左右侧分别取下软骨终板共计32份作为空白对照组，分为D（左侧）、E（右侧）组，每组16 份。通过免疫组化方法对5 组软骨终板的Ihh、PTHrP的表达进行检测，观察两种因子在各组中的表达水平及部位，并检测其在各样本中的平均光密度值。结果：1、猪侧弯模型各节段椎体终板HE染色均存在类似长骨的生长板结构，呈淡蓝色，大致可分为储备区、增生区、成熟区及钙化区，实验组顶椎凹侧生长板较凸侧稍薄，双侧细胞数及细胞体积无明显差异，空白对照组间双侧未见明显差异；2、Ihh 主要表达于软骨终板中的增殖软骨细胞及肥大软骨细胞胞浆中，PTHrP在软骨终板中的储备区、增殖区及成熟区软骨细胞胞浆中均存在表达，但以增殖区及成熟区软骨细胞中的表达为主；3、Ihh在A、B、C、D、E五组的表达量分别为0.3504±0.0233，0.2473±0.0286，0.1126±0.0306，0.2189±0.0366，0.2365±0.0226，PTHrP在A、B、C、D、E 五组的表达量分别为0.4306±0.0154，0.2376±0.0248，0.1473±0.0229，0.2471±0.0218，0.2685±0.0456；A组与B、C、D、E组比较，p 值均0.01，具有统计学差异；C 组与A、B、D、E组进行比较，p值均0.01，具有统计学差异；B、D、E组进行比较，p 值均0.01，无统计学差异；4、对Ihh、PTHrP的表达进行简单相关分析，r值=0.585，p值0.01，具有统计学意义，存在正相关关系。结论：1、软骨终板的成骨活性在实验组中凸侧明显高于凹侧，而在空白对照组双侧则无明显差异；2、Ihh、PTHrP在实验组中的表达为A（凸侧）B（中央）C（凹侧），这种差异性表达可能与猪脊柱侧凸模型的形成密切相关；3、Ihh、PTHrP 在各组中的表达量存在差异，但两者表达呈正相关。3关键词：猪；软骨终板；特发性脊柱侧凸；Ihh ；PTHrP4TheexpressionandsignificanceofPTHrPandIhhinvertebralcartilageendplateinscoliosisofporcinemodelAbstractISismorecommoninaclinicalthree-dimensionalspinaldeformity,especiallyoccursin childrenandadolescents,itspathogenesisiscomplex,andthecauseisnotyetexplicit. Endochondralboneformationisthemainwaythetrunkofboneformation,thereforethe upperandlowerendofthevertebralendplatecartilage,whichisacloserelationship betweentheactivityofosteobl