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SAA 对 THP-1 巨噬细胞 SR-BI 和炎症因子表达的影响及机制探讨研究生：朱明燕导师：曾高峰 主任医师 专业：心血管内科中 文 摘 要目的：B 类 I 型清道夫受体(scavenger receptor class B type I, SR-BI)是介导胆固醇 逆转运(reverse cholesterol transport, RCT)最重要的膜蛋白之一，它对动脉粥样硬 化（atherosclerosis, As）有保护作用。必威体育精装版研究发现，炎症反应能影响 RCT，进 而影响周围血管胆固醇外流及 As 的发生发展。血清淀粉样蛋白 A(serum amyloid-a, SAA)能诱导人体巨噬细胞炎症反应，显著增加脂多糖（lipopolysaccharides, LPS）诱导的炎症产物 IL-10，TNF-α，和 IL-6 的表达，且 能抑制高密度脂蛋白的抗炎作用,促进 As 的进展。本实验主要观察 SAA 对 THP-1 巨噬细胞 SR-BI 及炎症反应表达调节的影响，并探讨其相关机制。方法：培养 THP-1 细胞株，用 160 nmol/L 的佛波酯（phorbol 12-myristate13-acetate， PMA）刺激细胞 12 小时，使其诱导分化为巨噬细胞，换无血清培养基，分小组 以不同浓度的 SAA（0，100，200，400，800 ng/ml）处理 THP-1 巨噬细胞 24 小时，或以 400ng/ml 的 SAA 处理细胞不同时间（0，4，8，16，32 小时），或以 400 ng/ml 的 SAA 分别与 P38 激动剂(anisomycin)或抑制剂(SB203580)共同处理细 胞 24 小时，分别采用 RT-PCR 检测 SR-BI mRNA 的表达，Western blot 检测磷酸 化 P38 蛋白的表达，Western blot 及细胞免疫组织化学方法检测细胞 SR-BI 的表 达，ELISA 检测炎症因子（MCP-1、TNF-α、IL-1β）的表达。 结果：与空白对照组相比，SAA 处理细胞后，炎症因子（MCP-1、TNF-α、IL-1β） 的表达上调，而 SR-BI mRNA 及蛋白质的表达受到抑制，这种效应呈浓度和时 间依赖性，并且磷酸化 P38 蛋白质的表达也上调；与 SAA 单独处理组比较，SAA 与 P38 激动剂共同处理细胞后，其 SR-BI 表达下调，炎症因子及磷酸化 P38 蛋 白表达增加；而 SAA 与 P38 抑制剂共同处理细胞后，其 SR-BI 表达相对增加， 炎症因子及磷酸化 P38 蛋白表达相对减少。2结论：SAA 增加 THP-1 巨噬细胞炎症因子（MCP-1、TNF-α、IL-1β）的表达，抑制 SR-BI 的表达，促进 THP-1 巨噬细胞炎症反应；SAA 的作用可能与 P38 蛋 白的磷酸化有关，P38-MAPK 信号途径可能参与了 SR-BI 的表达调节及 SAA 刺 激的 THP-1 巨噬细胞炎症反应。SAA 通过 P38-MAPK 信号途径抑制 SR-BI 的表 达，促进炎症反应，可能发挥促 As 的作用。关键词：B 类 I 型清道夫受体，血清淀粉样蛋白 A，P38-MAPK，THP-1 巨噬细 胞，动脉粥样硬化3Effects and Preliminary Mechanism of SAA on SR - BI and Inflammatory Factor Expression in THP-1 MacrophageABSTRACTObjective: Scavenger receptor class B type I (SR-BI) is one of the most important membrane proteins ， which mediated reverse cholesterol transport(RCT), has protective effect on atherosclerosis. A new study has been found that the inflammatoryresponse affect reverse cholesterol transporter, and then affect the incidence of cholesterol efflux and atherosclerosis development. Serum amyloid A (SAA) can induce the inflammatory response of human macrophage, and get a significant increase in the expression of i