土壤脲酶(solid-urease,s-ue)测定试剂盒使用说明.pdf

土壤脲酶 （Solid-Urease，S-UE）测定试剂盒使用说明 分光光度法50管/24样 产品简介： S-UE能够水解尿素，产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含 量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。 本法以尿素为基质，利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N，生成的蓝色靛 酚和氨的浓度成正比。 试验中所需的仪器和试剂： 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、甲苯 （不允许快递） 和蒸馏水。 产品内容： 试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保存；（自备） 试剂二：粉剂×1瓶，临用前加入20mL蒸馏水，充分溶解待用，4℃保存； 试剂三：液体65mL×1瓶，4℃保存； 试剂四A液：液体4mL×1瓶，4℃保存；试剂四B液：液体8mL×1瓶，4℃保存；临用 前将A液倒入B液中混合，待用； 试剂五：液体 10mL×1瓶，4℃保存； 标准品：液体 1mL×1支， 1mg/ml氮标准液 操作步骤： 1、培养 试剂名称 测定管 对照管 风干土样 （） 0.25 0.25 g 试剂一 （μ） 125 125 L 振荡混匀，使土样全部湿润，室温放置15min 试剂二 （μL） 625 蒸馏水 （μL） 625 试剂三 （μL） 1250 1250 混匀，放入37℃水浴培养24h后，10000g常温离心10min，取上清液。 2、将培养结束的上清液稀释10倍 （取0.1mL上清液，加入0.9mL蒸馏水）若吸光值仍 大于1.5继续稀释。 3、标准品的准备：吸取适量的标准溶液，稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0μg/ml。 4、测氨量 测定管 对照管 标准管 稀释后的上清液标准液 （μL） 400 400 400 试剂四 （μ） 80 80 80 L 试剂五 （μ） 60 60 60 L 充分混匀，室温放置20min 蒸馏水 （μL） 460 460 460 混匀，630nm处蒸馏水调零，测A值，ΔA A测定管-A对照管。每个测定管设一个对照 管。 标准曲线的建立：根据标准管的浓度 （y）和吸光度 （x），做标准曲线。 脲酶活力的计算： 根据标准曲线，将ΔA带入公式 （x）计算测定中样品的浓度 （μg/mL）y值。 单位的定义：每天每g土样中产生1μg NH3-N定义为一个酶活力单位。