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玉竹中甾体皂甙提取工艺研究 　　摘要：通过正交试验，以甲醇为溶剂，采用回流提取法，对玉竹中甾体皂甙提取方法进行优化，并对两年生及三年生玉竹中甾体皂甙含量进行测定。结果表明，提取时间４ ｈ、提取３次、药液比１４为最佳提取工艺，两年生玉竹中甾体皂甙含量高于三年生。 　　关键词：玉竹；甾体皂甙；提取工艺 　　中图分类号：Ｑ９４９．７１＋８．２３；Ｒ２８４．２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８11401－0140-02 　　 　　Study on Extracting Process of Steroidal Saponins from Polygonatum odoratum 　　 　　ＸＩ Ｇｕａｎｇ－ｓｈｅｎｇ，ＺＨＡＮＧ Ｙｉｎｇ 　　 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｕｓｉｎｇ ｍｅｔｈａｎｏｌ ａｓ ｓｏｌｖｅｎｔ ａｎｄ ｒｅｆｌｕｘ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ， ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｐｒｏｃｅｓｓ ｏｆ ｓｔｅｒｏｉｄａｌ ｓａｐｏｎｉｎｓ ｆｒｏｍ Ｐｏ１ｙｇｏｎａｔｕｍ ｏｄｏｒａｔｕｍ ｗａｓ ｄｅｆｉｎｅｄ ｂｙ ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ ｔｅｓｔ． Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ， ｒａｔｉｏ ｏｆ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏ ｌｉｑｕｉｄ， １４； ａｎｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ４ ｈｏｕｒｓ ｆｏｒ ３ ｔｉｍｅｓ． Ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｓｔｅｒｏｉｄａｌ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｅｃｏｎｄ－ｙｅａｒ ａｎｄ ｔｈｉｒｄ－ｙｅａｒ ｐｌａｎｔ ｗａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ； ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｓｅｃｏｎｄ－ｙｅａｒ ｐｌａｎｔ ｈａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｓｔｅｒｏｉｄｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ ｔｈｅ ｔｈｉｒｄ－ｙｅａｒ ｐｌａｎｔ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｐｏ１ｙｇｏｎａｔｕｍ ｏｄｏｒａｔｕｍ； ｓｔｅｒｏｉｄａｌ ｓａｐｏｎｉｎｓ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｐｒｏｃｅｓｓ 　　 　　玉竹是我国传统中药，具有养阴、润燥、除烦、止渴的功效。《中国药典》中规定其基源为百合科黄精属植物玉竹Ｐｏ1ｙｇｏｎａｔｕｍ ｏｄｏｒａｔｕｍ Ｄｒｕｃｅ的根茎。多糖是玉竹中的活性成分，也是药典中含量测定的检测指标。除多糖外，甾体皂甙是其中主要的次生代谢产物，目前国内外学者已先后从中分离到１４种甾体皂甙［１－３］。 　　为了综合评价玉竹药材的品质，对玉竹中的甾体皂甙进行研究，以提取时间、提取次数和药液比三因素进行分析，确定了最佳提取工艺。同时采用最佳提取工艺，测定了不同生长年限的玉竹样品中甾体皂甙的含量，为确定其最佳采收年限提供了理论依据。 　　１材料与方法 　　１．１材料 　　１．１．１仪器ＵＶ－１７００紫外可见分光光度计，２２０型恒温水浴锅，千分之一电子天平，旋转蒸发仪。 　　１．１．２试剂和药材甲醇为分析纯。新鲜玉竹Ｐｏ１ｙｇｏｎａｔｕｍ ｏｄｏｒａｔｕｍ Ｄｒｕｃｅ的根茎采自吉林左家地区，由奚广生教授鉴定，切片备用。原蜘蛛抱蛋甙对照品自制。 　　１．２方法 　　１．２．１检测波长的选择玉竹中的甾体皂甙多具有５－６位双键，在２０５～２２５ ｎｍ处都有紫外吸收，但基于检测溶剂为甲醇，其在２１０ ｎｍ处有紫处吸收，对样品测定造成干扰，故选择２２０ ｎｍ作为玉竹中甾体皂甙类成分的检测波长。 　　１．２．２对照品溶液的配制精密称取原蜘蛛抱蛋甙１．２ ｍｇ，甲醇定容至５０．０ ｍＬ，作为对照品溶液。 　　１．２．３标准曲线的制备分别精密移取对照品溶液１．０、１．５、２．０、２．５、３．０ ｍＬ置１０．０ ｍＬ容量瓶中，用甲醇定容至刻度。采用紫外可见分光光度计测定。以吸光度对浓度做标准曲线。结果如图１。 　　１．２．４正交试验设计称取三年生玉竹鲜品每份５０ ｇ，切片，采用甲醇回流提取。选定提取时间、提取次数、药液比三因素三水平，选用Ｌ９正交表进行试验。样品置２５０．０ ｍＬ锥形瓶中，根据试验设计加入相应体积的甲醇［４，５］，水浴加热，回流提取，合并提取液，减压回收溶剂，得浸膏，称量浸膏。 　　１．２．５不同生长年限玉竹中甾体皂甙的含量测定根据玉竹甾体皂甙提取正交试验结果选出最佳提取方案，对５０ ｇ两年生和三年生玉竹中甾体皂甙进行提取，得浸膏，加５０．０ ｍＬ甲醇超声溶解，取１０ μＬ定容至１０．０ ｍＬ的容量瓶中，根据标准曲线测定其中甾体皂甙浓度，计算平均含量。 　　２结果与分析 　　２．１正交试验和方差分析结果 　　玉竹中甾体皂甙提取工艺研究结果见表２。由表２可以看出，Ａ、Ｂ、Ｃ三因素对试验结果影响大小排序为Ｂ＞Ｃ＞