12转氨基作用.ppt

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2018-02-12 发布于江西
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12转氨基作用

一、目的 1、了解转氨酶的性质及临床意义 2、掌握谷丙转氨酶活力的测定方法二、原理丙氨酸与α-酮戊二酸在pH7.4时，经ALT催化转氨基作用生成丙酮酸和谷氨酸。丙酮酸与2，4－二硝基苯肼作用，生成棕红色丙酮酸2，4－二硝基苯腙。颜色的深浅表示酶活力的大小。本实验以肝脏和肌肉进行比较。三、试剂 pH7.4缓冲液　 ALT基质液　 2，4－二硝基苯肼肝匀浆、肌匀浆　　四、实验操作将家兔处死后，立即取出肝和肌肉，分别以冰生理盐水洗去血液。取10克新鲜肝和肌肉组织，分别剪碎，加pH7.4缓冲液至100ml，研成匀浆后再加pH7.4缓冲液20ml混匀，此液即为肝和肌肉匀浆。取试管三支按下表操作(单位ml)：五、结果与讨论比较三管颜色深浅，说明哪种组织转氨酶活力高。六、思考题：两步水浴各有什么作用？当血清ALT升高时，对临床诊断有什么指导意义？临床上ALT定量测定的方法原理是什么？设计实验将ALT定量测定。 * * * * *