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13 电化学发光免疫检测
电化学发光免疫检测 ECL 与CL的差异 ECL是电启动发光反应 CL是通过化合物混合启动发光反应。 ECL 不仅可以应用于所有的免疫测定,而且还可用于DNA/RNA探针检测。 检测方法示意图 电化学发光免疫检测原理(以TSH检测为例) 第一步:结合了活化的三联吡啶钌衍生物即[Ru(bpy)3]2+ + N羟基琥珀酰胺酯(NHS)的TSH抗体和结合了生物素的TSH抗体与待测血清同时加入一个反应杯中孵育9分钟. * 电化学发光免疫测定(Electrochemiluminescence immunoassay, ECLI)是继放射免疫、酶免疫、荧光免疫、化学发光免疫测定以后的新一代标记免疫测定技术,是电化学发光(ECL)和免疫测定 相结合的产物。 它的标记物的发光原理与一般的化学发光(CL)不同,是一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应,实际上包括了电化学和化学发光二个过程。 第二步:将被链霉亲和素包被的磁珠加入反应杯中,再次孵育9分钟,使生物素通过与亲和素的结合将磁珠、TSH抗体连接为一体,形成双抗体夹心法。 下一步,蠕动泵将形成的 [Ru(bpy)3]2+-抗体-抗原-抗体-磁珠复合体吸入流动测量室,此时,磁珠被工作电极下面的磁铁吸附于电极表面。同时,游离的TSH抗体(与生物素结合的和与[Ru(bpy)3]2+结合的抗体)也被吸出测量室。 *
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