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肌酐实验室检测讲座 石家庄肾病医院检验科　0311肌酐的测定 血清非蛋白含氮化合物的一种，肌肉组织中肌酸或磷酸肌酸代谢的最终产物。 肌酐的排出量相当恒定，不受食物蛋白质含量及尿量的影响而与肌肉发达程度、性别及年龄有关。 肌酐的测定是临床诊断的重要指标。 肌酐检测分类： （一）化学法：碱性苦味酸法 1.漂白土碱性苦味酸法 2.阳离子交换树脂法 3.速率法 4.双PH法（二次读数法） （二）酶法： 1.肌酐酰胺水解酶法 2.肌酐亚氨水解酶法 （三）高效液相色谱法 碱性苦味酸法： 碱性溶液 肌酐 + 苦味酸 肌酐-苦味酸加成物 （红色） 510nm比色 pH 4： 肌酐-苦味酸加成物 肌酐-苦味酸加成物 （红色） （黄色） 碱性苦味酸法测定肌酐存在非特异的色素原干扰： 干扰物质： 抗坏血酸、a-酮酸、丙酮、乙酰乙酸、葡萄糖、蛋白质、胍以及其它化合物。 这些不是肌酐而能与碱性苦味酸反应生成红色的物质称为假肌酐。 *相当大量的假肌酐存在与红细胞中，测定时不宜采用全血。 排除干扰方法： 1.漂白土吸附法： 一种硅酸铝土,酸性条件下吸附无蛋白血滤液中的肌酐，然后加入碱性苦味酸试剂洗脱肌酐并显色。 2.阳离子交换树脂法： 阳离子交换树脂（Ag50WX2，100~200目）吸附血清或尿中肌酐，肌酐洗脱后与碱性苦味酸反应。 3.速率法（动力学法）： 根据肌酐和碱性苦味酸形成复合物 的速度与非肌酐干扰物的不同，且肌酐的反应速度与浓度成正比的原理。 干扰物质： a.快反应物质 最初30s内反应 b.慢反应物质 120s以后反应 肌酐反应：31~60s 该法有助于解决反应的特异性，可消除某些非化学反应的干扰且简单、快速 4.双pH法（二次读数法）： 利用肌酐苦味酸复合物和假肌酐质与苦味酸复合物的色泽稳定性差别原理。 肌酐 假肌酐 +碱性苦味酸 红色复合物 红色复合物 酸化至pH4 酸化至pH4 褪色 不褪色 （二）酶法： 1.肌酐酰胺水解酶法： 肌酐水合酶 肌酐 + H2O 肌酸 肌酸激酶 肌酸 + ATP 磷酸肌酸 + ADP 丙酮酸激酶 ADP + 磷酸烯醇式丙酮酸 丙酮酸 + ATP 乳酸脱氢酶 丙酮酸 + NADH +H+ 乳酸 + NAD+ 340nm比色 2.肌酐亚氨水解酶法： 肌酐酶水解 肌酐 N-甲基内酰 + NH3 溴酚蓝电极 或离子电极 测NH3 酶法优点：特异性高、准确性好 缺点：酶试剂昂贵、来源困难、不易保存 （三）高效液