18 巴氏杆菌及相关属.ppt

第十八章 巴氏杆菌及相关属 岳 华 第一节??巴氏杆菌属(Pasteurella) 本属细菌已报道有20多种，多杀性巴氏杆菌是本属中最重要的畜禽致病菌，其次是溶血性巴氏杆菌，后者新近被划入新建立的曼氏杆菌属，更名为溶血性曼氏杆菌。我国较常见的鸭疫巴氏杆菌现已划出本属，并更名为鸭疫里氏杆菌。 多杀性巴氏杆菌 (P·multocida) 本菌是引起多种畜禽巴氏杆菌病 (亦称出血性败血症)的病原体，主要使动物发生出血性败血病或传染性肺炎。本菌广泛分布于世界各地，正常存在于多种健康动物的口腔和咽部黏膜，当动物处于应激状态，机体抵抗力低下时，细菌侵人体内，大量繁殖并致病，发生内源性传染。 形态及染色 为球杆状或短杆状菌，两端钝圆，大小为0.25～0.4um×0.5～2.5um。单个存在，有时成双排列。病料涂片用瑞氏染色或美蓝染色时，可见典型的两极着色，即菌体两端染色深，中间浅，无鞭毛，不形成芽孢，新分离的强毒菌株有荚膜，革兰氏染色阴性。 培养及生化特性 需氧或兼性厌氧菌。对营养要求较严格。在普通培养基上生长贫瘩，在麦康凯培养上不生长。在加有血液、血清或微量血红素的培养基中生长良好。最适温度为37℃，pH7.2～7.4。在血清琼脂平板上培养24h，可长成淡灰白色、闪光的露珠状小菌落。在血琼脂平板上，长成水滴样小菌落，无溶血现象。 血清型 本菌主要以其荚膜抗原和菌体抗原区分血清型，前者有6个型，后者分为16个型。1984年Cater提出本菌血清型的标准定名:以阿拉伯数字表示菌体抗原型，大写英文字母表示荚膜抗原型。我国分离的禽多杀性巴氏杆菌以5:A为多，其次为8:A;猪的以5:A和6:B为主，8:A与2:D其次;羊的以6:B为多;家兔的以7:A为主，其次是5:A。C型菌是犬、猫的正常栖居菌，F型主要发现于火鸡，致病作用均不清楚。 抵抗力 本菌抵抗力不强。在无菌蒸馏水和生理盐水中很快死亡。在阳光中暴晒lOmin，或在56℃l5min或60℃10min，可被杀死。厩肥中可存活1个月，埋入地下的病死鸡尸，经4个月仍残存活菌。在空气干燥中2～3d可死亡。3%石炭酸、3%福尔马林，10%石灰乳，2%来苏儿，0·5%～1%氢氧化钠等5min可杀死本菌。 对青霉素、链霉素、四环素、土霉素、磺胺类及许多新的抗菌药物敏感。 本菌接种马丁肉汤或其平板，生长后置4℃保存，每半月应移植一次。冻干菌种在低温中可保存长达26年。 致病性与免疫性 本菌是多种动物的重要病原菌。对鸡、鸭、鹅、野禽、猪、牛、羊、马、兔等都可致病，急性型呈出血性败血症迅速死亡;亚急性型于黏膜关节等部位，发生出血性炎症等;慢性型则呈现萎缩性鼻炎 (猪、羊)、关节炎及局部化脓性炎症等。实验动物中小鼠极易感染，鸽对杀禽亚种的易感性强。 症 状 急性型 是本病主要和常见的病型。除具有败血症的一般症状外，还表现急性胸膜肺炎。 属于D血清型的某些菌株能产生一种耐热的外毒素，分子量约150000，对Vero细胞有毒性，可致豚鼠皮肤坏死及小鼠死亡。用此毒素接种猪可复制典型的猪萎缩性鼻炎 (AR），从而修正了波氏杆菌是AR的病原菌的观点。在大多数情况下，AR由产毒素的本菌与波氏杆菌混合感染所致，本菌起主导作用。 带菌健康动物具有一定程度的免疫力。动物患病痊愈后，可获得较强的免疫。国内外已研制出多种灭活、弱毒菌苗以及其荚膜亚单位疫苗。该菌的高免多价血清具有良好的紧急预防和治疗作用。 微生物学诊断 1·显微镜检查 采取渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等新鲜病料涂片或触片，以碱性美蓝液或瑞氏染色液染色，显微镜检查，如发现典型的两极着色的短杆菌，结合流行病学及剖检，即可作初步诊断。但慢性病例或腐败材料不易发现典型菌体，须进行培养和动物试验。 2·分离培养 最好用血琼脂平板和麦康凯琼脂同时进行分离培养，麦康凯培养基上不生长，在血琼脂上生长良好，菌落不溶血，革兰氏染色为阴性球杆菌。将此菌接种在三糖铁培养基上可生长，使底部变黄。必要时可进一步做生化反应作鉴定。 3.动物试验 用病料研磨制成悬液，或用分离培养菌，皮下注射小鼠、家兔或鸽，动物多在24～48h内死亡。由于健康动物呼吸道内常可带菌，所以应参照患畜的生前临床症状和剖检变化，结合分离菌株的毒力试验，作出最后诊断。 若要鉴定荚膜抗原和菌体抗原型，则要用抗血清或单克隆抗体进行血清学试验。检测动物血清中的抗体，可用试管凝集、间接凝集、AGP或ELISA。 第二节 里氏杆菌属 鸭疫里氏杆菌 是本属的代表种，原名鸭疫巴氏杆菌。Rossau等 (1991)和Segers(1993)先后证实，该菌与巴氏杆菌属的rRNA不同源，是革兰氏阳性需氧菌的rRNA第5超属，与黄杆菌等相近，因此建议建立