第七章需氧和兼性厌氧球菌的鉴定PPT.pptx

;第 七 章 需氧和兼性厌氧球菌鉴定;本 章 内 容;学习目标及重点;概述; 一、生物学特性 1.形态与染色 本属菌多为球形，直径0．5～1．5um。葡萄球菌无鞭毛，无芽胞、无荚膜 （1）在液体培养基上：呈单个、成双或短链状排列 （2）在固体培养基上：呈葡萄串状排列 （3）脓汁标本中：呈单个散在或少数呈葡萄串状排列 ;第一节 葡萄球菌属;第一节 葡萄球菌属;第一节 葡萄球菌属; （4）在高盐甘露醇平板上：大多数葡萄球菌耐盐性强（10%～15%g/L NaCl培养基中生长）。此平板常作为选择性培养基，菌可分解甘露醇使指示剂呈淡黄色。G-菌在此平板上不生长 ;第一节 葡萄球菌属;第一节 葡萄球菌属;第一节 葡萄球菌属;第一节 葡萄球菌属;二、临床意义;第一节 葡萄球菌属;微生物检验程序; 1.标本：主要有血液、尿液、痰液、脑脊液、穿刺液和浓液等。; 3. 增菌培养 血液标本增菌培养，24h培养后每日观察增菌液变化。如无变化，需培养7d，其中盲目传代2次，如无细菌培养可报“血液标本经7d培养无菌生长”。如发生混浊、内有胶胨样凝块等现象可进行进一步分离培养和革兰染色;5.生化反应： （1）触酶试验：阳性。 ; 5.生化反应 （3）耐热DNA试验 ; 5.生化反应 ;; 5.生化反应 ;5.生化反应 （8）其它非培养鉴定或检查方法： 1）免疫学方法：用ELISA或对流免疫电泳方法检测金黄色葡萄球菌磷壁酸抗体 2）分子生物学方法：用商品化Accu探针对培养物进行鉴定，用脉冲场凝胶电泳法（PFGE）对葡萄球菌的质粒和染色体进行限制性核酸内切酶分析等 ;6.药敏试验;6.药敏试验; ; 7.鉴定 按科→属→种的顺序 （1）科间鉴别; 7.鉴定 按科→属→种的顺序 ;菌名; ?金黄色葡萄球菌系毒力很强的致病菌，无论从任何标本中分离出均应及时鉴定，进行药敏试验和尽快报告临床。 ?从输液导管、人工植入组织中分离出表皮葡萄球菌和从尿液标本中分离出腐生葡萄球菌应视为病原菌 （葡萄球菌的尿液培养菌落计数应考虑103～104为阳性菌尿标准）。 ?其它凝固酶阴性葡萄球菌引起感染流行或临床治疗失败时，应考虑将???鉴定到种。当MRSA对头孢菌素类的体外药敏试验表现为“敏感”时，不能将这种假象向临床报告，以免造成错误导向。因为体内活性试验已证实头孢菌素类对MRSA无效。; 第二节 链球菌属; 1.形态与染色 G+球菌，直径0.5～1um （1）液体培养基中链状排列，长短不一。短由4～8个菌组成，长者可达20～30个细菌组成 （2）在固体培养基或脓汁标本中，呈短链、成双或单个散在排列; 链球菌幼龄时可见荚膜，继续培养荚膜消失 肺炎链球菌常常呈双排列，故又称为肺炎双球菌。在动物体内它可形成较厚的荚膜 链球菌属无鞭毛、无芽胞; 2.培养特性 营养要求高，在5%～10%CO2环境下生长更好 ; 3.生化反应 生化活性较活跃：触酶阴性，葡萄糖+，菊糖－ ; 3. 生化反应; 3. 生化反应; 4.分类 根据下述链球菌的溶血特征和Lancefield血清学等传统的分类法，目前仍然是临床实验室鉴定链球菌的常规使用方法。;（2）根据抗原结构分类：链球菌Ag结构较复杂，含多种抗原，主要有：;（4）综合溶血性、抵抗力、生化反应性状分类;二、临床意义; 溶血毒素O：耐热，含-SH基的蛋白质，对氧敏感，易被氧化成-S-S，失去溶血能力 溶血毒素S：多肽，分子量少，对氧稳定，血平板上的溶血现象由它引起 检测抗“O”抗体，可辅助诊断链球菌性疾病如风湿热及链球菌感染后的肾小球肾炎; 第二节 链球菌属;微生物检验程序; 1. 标本采集：标本类型有血液、尿液、创伤标本、脓性分泌物等 ;三、微生物学检验; ; 5．鉴定实验 链球菌属细菌的鉴定应根据其菌体形态、菌落形态和溶血特征，结合以下鉴定试验进行。 ; 5．鉴定实验;Lancefield血清学凝集试验;　　甲型溶血性链球菌和丙型链球菌鉴定到肺炎链球菌、D群链球菌，其他的统称为草绿色链球菌。; 青霉素 6.5%NaCL肉汤生长 D群链球菌 S - 肠球菌