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2第二章 生物化学检验中的诊断酶学PPT.ppt

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2第二章 生物化学检验中的诊断酶学PPT

第二章 生物化学检验中的诊断酶学 ;KEY POINTS;Major Objectives;Major Objectives;Brief Contents;第一节组织和体液中的酶;一、正常血浆中的酶;1.正常血浆酶的来源;(1)血浆特异酶:;(2)非血浆特异酶:;;2.正常血浆酶的去路;1.细胞内外酶浓度的差异;2.酶的相对分子量;3.酶的组织分布;4.酶在细胞内的定位和存在形式;5.酶的半寿期;人体血浆常用酶或同工酶的半寿期比较;1.性别;2.年龄;碱性磷酸酶和酸性磷酸酶的年龄差异(K-A法,IU) ;3.饮食与药物;4.运动;健康人激烈运动停止后休息时的血浆酶活性的变化情况;5.妊娠与分娩;二、血浆酶的病理性变化;(一)酶合成异常;(二)酶释放增加;;;(三)酶排出异常;三、血浆中的巨酶;四、其他体液中的酶;血液以外其他体液中常见的酶;第二节 生物化学检验中酶的测定;本节内容;一、酶活性浓度的测定;(一)酶活性浓度测定的 基本原理;酶催化活性的途径;酶活性与反应速率的关系;酶促反应过程的分期;酶促反应时间进程曲线;注意事项;(二)酶活性浓度的测定方法;酶活性浓度的测定方法;定时法;定时法中酶促反应的过程;注意事项;连续监测法;连续监测法的时间进程曲线;注意事项;底物或产物浓度的检测;底物或产物浓度的检测;直接法;基于NADH或NADPH理化特性的测定方法;基于人工合成色素原底物理化特性的测定方法;;间接法;化学法;酶偶联法;(三)酶偶联反应法;酶偶联反应法的基本原理;;酶偶联反应法的反应进程;酶偶联法的吸光度变化示意图;注意事项;(四)工具酶与共通反应途径;工具酶;;共通反应途径;两类常用的通用反应途径 ;(五)酶活性浓度的单位;酶活性浓度的单位;正常上限倍数;二、酶质量浓度的测定;酶浓度;酶蛋白浓度测定的方法;酶浓度测定的免疫化学方法;CK-MB;CK-MB;注意;免疫化学法测定酶浓度的优缺点;免疫化学法测定酶浓度的优缺点;酶的免疫化学测定的局限性;三、同工酶及其亚型测定;同工酶的概念;;同工酶的测定;电泳法;区带分离;活性显色;常用的显色系统;常用的显色系统;常用的显色系统;检测结果;血清LD 同工酶的琼脂糖凝胶电泳分离图谱;免疫分析法;免疫抑制法;计算;优缺点;免疫沉淀法;四、酶活性浓度测定的主要影响因素;(一)标本及采集和处理的影响因素;1.1 溶血 ;1.1 溶血影响的控制;1.2 抗凝剂;1.2 肝素;1.3 温度;1.4 空气与光线;1.5 副反应;1.6 酶蛋白浓度;(二) 试剂及方法学的影响因素;2.1 定时法与连续监测法的选用;2.1 连续监测法与定时法 的酶促反应时间进程曲线;2.2 检测底物或检测产物的选择;2.3 底物启动模式与样品启动模式;2.3 底物启动模式与样品启动模式;2.4 正向反应与逆向反应 ;2.5 检测试剂的干扰作用;(三) 仪器因素的影响及控制;3.1 酶活性浓度的计算公式;3.2 校准物;3.2 校准物;3.3 ε的校准(340 nm波长);3.3 ε的校准(405 nm波长);3.4 K的校准(酶校准物);3.4 K的校准(频率);(四) 测定条件与参数设置;4.1 最适条件包括;4.2 反应温度;第三节 体液中常见酶及同工酶的生物化学检验;本节内容;一、丙氨酸氨基转移酶的测定;(一)测定方法;(二)临床意义;;;二、门冬氨酸氨基转移酶及其同工酶的测定;(一)测定方法;(二)临床意义;;三、γ-谷氨酰基转移酶及其同工酶的测定;(一)测定方法;(二)临床意义;;;四、肌酸激酶及其同工酶测定;(一)测定方法;;(二)临床意义;五、乳酸脱氢酶及其同工酶的测定;(一)测定方法;(二)临床意义;;;六、碱性磷酸酶及其同工酶的测定;;(一)测定碱性磷酸酶;(二)临床意义;;;七、酸性磷酸酶及其同工酶;(一)测定方法;(二)临床意义;八、淀粉酶酶及其同工酶的测定;(一)测定方法;(二)临床意义;;九、脂肪酶;(一)测定方法;(二)临床意义;;十、胆碱酯酶;(一)测定方法;(二)临床意义;;;第四节 酶学检测在临床上的应用;本节内容;一、体液酶测定在临床诊断中的作用;(一)病变的组织或器官定位;重要器官的特异性酶及意义;(二)临床疾病病理过程评估;(三)组织细胞损伤程度诊断;(四)临床疾病的诊断;急性胸痛或腹痛的酶型;二、临床酶学在临床诊断中的应用;;三、同工酶及其亚型检测的临床意义;临床常用的同工酶及其亚型检测的临床意义;THE END

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