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体液中酶的生物化学检验 1 临床检验教研室 龚晓华 1、掌握临床诊断中常用酶与同工酶的检测方法、参考区间及临床意义 2、熟悉酶及同工酶的基本概念、分类与特征 本章教学要求： 2 第一节 概述 3 一、基本概念 酶（E）：具有催化作用的生物大分子，在生命进程中发挥着重要作用。除少数酶是核酸外，绝大多数酶是蛋白质 酶的底物（S）：酶所催化的反应物 酶的产物（P）：酶促反应的生成物 酶的活性：酶的催化能力的大小 4 二、酶的分类 单纯酶 结合酶 酶蛋白（蛋白质部分） 辅助因子 辅酶（非共价键结合） 辅基（共价键结合） 1、酶分子的组成 5 2、催化的反应性质 1.氧化还原酶 2.转移酶 3.水解酶 4.裂合酶或裂解酶 5.异构酶 6.合成酶或连接酶 酶的命名采用系统命名法 6 8 9 四、血清酶 血浆特异酶（血浆固有酶）：凝血酶、纤溶酶、胆碱酯酶、铜氧化酶（铜蓝蛋白）、脂蛋白酯酶等 非血浆特异酶：外分泌酶和细胞酶 （一）分类 10 （二）影响血清酶的因素 1、生理变化 性别 年龄 饮食 运动 妊娠 11 2、病理变化 （1）酶合成异常：大多数酶在肝脏合成 （2）酶释放增加：酶从病变（或损伤）细胞中释放增加是疾病时大多数酶增高的原因 （3）酶清除异常：同酶的半寿期以及其他一些因素有关 血清酶的半寿期（T1/2）：指酶失活至原来活性一半时所需要的时间。半寿期长的酶，在血清中持续时间长。 12 13 第二节 临床诊断中常用的酶与同工酶 一、丙氨酸氨基转移酶（ALT） 也称谷丙转氨酶（GPT）一种参与人体蛋白质新陈代谢的酶，起加快体内蛋白质氨基酸在体内转化的作用，它广泛存在于人体各种组织、器官、肌肉、骨骼中，以肝细胞的细胞浆中最多。 14 （一）检测方法 连续监测法 可在340nm处连续监测NADH的消耗量，从而计算出ALT活性浓度。 L-丙氨酸+α-酮戊二酸 α-丙酮酸+L-谷氨酸 ALT α-丙酮酸+NADH+H+ 乳酸+NAD+ LD 15 （二）参考区间 男性：9--50U/L 女性：7--40U/L （三）临床意义 1、活性增高 （1）肝胆疾病：传染性肝炎、肝癌、中毒性肝炎、脂肪肝、胆管炎等 （2）心血管疾病：心梗、心肌炎、脑出血等 （3）药物和毒物 2、活性降低：磷酸吡哆醛缺乏症 16 二、天冬氨酸氨基转移酶（AST） 也称谷草转氨酶（GOT），AST和ALT是人体内糖和蛋白质相互转变所需的酶。AST广泛分布于全身各组织，尤其以心脏、骨骼肌、肝脏、肾脏中最为丰富，在细胞内定位于线粒体（ASTm）和胞质（ASTs）中，70%为ASTm 17 （一）检测方法 连续监测法 可在340nm处连续监测NADH的消耗量，从而计算出AST活性浓度。 L-天冬氨酸+α-酮戊二酸 草酰乙酸+L-谷氨酸 AST 草酰乙酸+NADH+H+ L-苹果酸+NAD+ MD 18 （二）参考区间 8--40U/L （三）临床意义 活性增高 （1）AST在心肌细胞中含量最高，心肌梗死时活性增高 （2）各种肝病 （3）肌炎、胸膜炎、肾炎、肺炎 19 三、γ-谷氨酰转移酶（GGT） 是一种含巯基的线粒体酶，参与体内谷胱甘肽的代谢。肾脏、肝脏和胰腺中含量丰富，但血清中GGT主要来自肝胆系统。GGT在肝脏中广泛分布于肝细胞的毛细胆管一侧和整个胆管系统，因此肝内合成亢进或胆汁排出受阻时，血清中GGT升高。 20 （一）检测方法 碱性条件下GCNA与甘氨酰甘氨酸反应的方法 （二）参考区间 男性：11--50U/L 女性：7--32U/L 21 （三）临床意义 1、肾脏疾病：血清中GGT活性升高不明显 2、肝脏疾病： （1）诊断恶性肿瘤肝转移和肝癌术后复发情况，阳性率可达90% （2）GGT同工酶II与AFP联合检测可原发性肝癌的检测阳性率明显升高 3、嗜酒或长期服用某种药物 22 四、肌酸激酶（CK） CK能催化高能磷酸键在肌酸和ATP之间转换。为二聚体结构，由M和B两个亚基构成，可组成三种同工酶，CK-MM（主要存在于骨骼肌中）、CK-BB（脑、平滑肌）、CK-MB（心肌）。 23 （一）检测方法 酶偶联法 （二）参考区间 男性：38--174U/L 女性：26--140U/L 24 （三）临床意义 1、心肌梗死：AMI发生后4-8h，CK开始升高，12-48h达高峰，可达正常上限的10-12倍，2-4天后降至正常。C