出凝血疾病的检测PPT.pptx

出凝血疾病的检测中国医学科学院血液病医院临床检测中心止血血栓室 孙海燕一期止血二期止血胶原暴露、TF等血管内皮下组织vWF5-HT、TXA2等血小板黏附、聚集、释放凝血系统激活血管收缩血小板血栓纤维蛋白网生理性止血血管损伤抗凝系统纤溶系统加固血凝块形成与维持激肽释放酶前激肽释放酶内源性凝血途径外源性凝血途径共同途径丢失不引起出血XIIXIIaHMW-KXIXIaVIIIXIXaTF +Ca2+PLVIIaVIIIVIIIaXXaPLVaVXIIIIIIIaCa2+XIIIaIIsIi凝血瀑布因子活性筛查抗体凝血因子II活性测定凝血因子V活性测定凝血因子VII活性测定凝血因子VIII活性测定凝血因子IX活性测定凝血因子X活性测定凝血因子XI活性测定凝血因子XII活性测定凝血因子XIII筛查APTTPTTTFbgDDimerFDP纠正试验特异性因子抗体（VIII）狼疮抗凝物检测凝血因子活性测定项目结果单位参考范围PT16.9S11-14INR1.470.87-1.2APTT109.4S23.7-36.0TT16.1S13.3-19.3FIB3.93g/L2-4FVIII56.8%50-150FIX39.2%50-120FXI41.3%50-120FXII27.0%50-120DRVVT筛选143.4S31-44DRVVT确认56.4S30-38DRVVT比值2.50.8-1.2结论提示狼疮抗凝物存在。凝血因子活性测定原理：凝血因子活性是通过其纠正乏该因子血浆所致的凝固时间延长的能力而测得的。梯度稀释已知凝血因子活性的血浆（标准品），与乏该因子的血浆混合，然后做APTT或PT测定，建立参考曲线。受检者血浆与乏该因子的基质血浆混合，测其APTT后PT值，通过标准曲线可计算其凝血因子的活性。因子缺乏或者假性降低：3个浓度当存在狼疮抗凝物等非特异性抗体时，凝血因子活性测定呈现稀释效应凝血因子活性测定项目结果单位参考范围PT16.9S11-14INR1.470.87-1.2APTT109.4S23.7-36.0TT16.1S13.3-19.3FIB3.93g/L2-4FVIII≥120.1（56.8；108.6）%50-150FIX≥119.4（39.2；75.6）%50-120FXI≥102.3（41.3；71.6）%50-120FXII≥59.4（27.0；47.5）%50-120DRVVT筛选143.4S31-44DRVVT确认56.4S30-38DRVVT比值2.50.8-1.2结论提示狼疮抗凝物存在。项目结果单位参考范围PT11.6S11-14INR0.950.87-1.2APTT129.9S23.7-36.0TT15.5S13.3-19.3FIB4.45g/L2-4DRVVT筛选39.8S31-44DRVVT确认32.6S30-38DRVVT比值1.20.8-1.2结论不提示狼疮抗凝物存在FVIII1（1;1）%50-150FIX≥84.9（19.9；52.2）%50-120FXI≥94.3（19.4；52.4）%50-120FXII≥23.8（8.7；18.0）%50-120VIII因子抑制物定量：489 Bethesda纠正试验反应管APTT（或PT）APTT（或PT）APTT（或PT）正常人混合血浆正常正常正常患者血浆延长延长延长正常+患者血浆即刻混合正常延长正常正常+患者血浆37℃孵育2H后正常延长延长解释提示凝血因子缺乏提示即时作用抗体存在提示时间依赖性抗体存在狼疮抗凝物实验室诊断标准*ISTH LA-SSC, 1995 (TH 74:1185) 2009 (JTH 7:1737-40); CLSI H-60A (2014) 延长的磷脂依赖的凝固时间：APTT、DRVVT、SCT、dPT等抑制的证据：纠正试验延长是磷脂依赖的：DRVVT（或SCT）证实试验、PNP等除外其他的循环抗凝物：因子特异性抗体、DTI、肝素、华法令等补充检测：抗心磷脂抗体、抗β2糖蛋白1抗体DRVVT （或SCT）DRVVT ScreenDRVVT ComfirmRVVRVVPL (restricted)Excess PL肝素中和剂肝素中和剂阳性：DRVVTScreen/DRVVT Comfirm 1.20.2ml0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml咪唑0.2ml咪唑0.2ml咪唑0.2ml咪唑患者血浆未稀释1:11:41:81:2取0.2ml+0.2mlNPP计算滴度检测因子活性0.2mlNPP+0.2ml咪唑37℃孵育2小时Bethesda Assay操作步骤APTT及（或）PT延长纠正试验纠正（因子缺乏）不能纠正（抑制）LA证实试验TT延长，FIB正常不能纠正纠正TT延长，FIB低肝素、DTI、异常血浆蛋白等因子活性低（无）纤