基因治疗技术与应用·PPT.ppt

3.1.2 恶性肿瘤的基因治疗 一、抑制和杀伤肿瘤细胞 自杀基因疗法 （TK、CD基因） 抑制癌基因的表达 （反义RNA、核酶、细胞内抗体） 恢复抑癌基因的功能 （p53、Rb基因） 抗肿瘤血管形成 二、肿瘤细胞的基因“修饰” 导入细胞因子基因 导入MHC基因和共刺激分子基因 三、调节和增强机体的免疫功能 细胞因子基因导入免疫细胞 基因修饰的树突状细胞 分泌免疫毒素的T淋巴细胞 肿瘤DNA疫苗 3.1.3 病毒性疾病的基因治疗 针对病毒: 诱导对病毒RNA的降解 抑制病毒与宿主细胞结合 干扰病毒基因组的转录起始和调控 抑制病毒基因组的复制和蛋白质合成 RNA干扰技术 3.2.1 中国的基因治疗 1991.12 血友病B，凝血因子IX，逆转录病毒载体，导入患者自身皮肤成纤维细胞。 恶性脑胶质瘤，TK基因 非小细胞肺癌，逆转录病毒，IL-2 血友病B的基因治疗 逆转录病毒载体 +FⅨ cDNA 重组体 5` LTR FⅨ neo SV PSO LTR 3` ①导入仓鼠细胞（CHO ）→FⅨ表达； ②导入乙型血友病患者皮肤成纤维细胞（体外培养）→FⅨ表达； ③91年，导入乙型血友病患者皮肤成纤维细胞（体外培养）→回植病人皮下→FⅨ基因表达，FⅨ基表达水平达正常人的5%。 3.2.2 基因治疗药物 2003年10月16日，拥有自主知识产权的重组人p53腺病毒注射液(Gendicine)获得国家食品药品监督管理局批准的新药证书。 这是世界上第一个获得正式批准的基因治疗药物。 3.3 基因治疗存在的问题 1999年“杰辛格”基因疗法失败. 18岁的泽西·杰辛格患有鸟氨酸氨甲酰基转移酶(OTC)缺失症，接受基因疗法后意外死亡。 合理性、困难性 安全性 2.1.1.4.1 抑癌基因疗法 抑癌基因： 是正常细胞内正常存在的，能抑制细胞转化和肿瘤生的一类基因群。 Rb基因，p53基因，MTS基因，nm23基因 2.1.1.4.2 反义核酸技术 反义RNA（antisense RNA） 与mRNA互补的RNA，抑制mRNA的加工与翻译。 核酶（ribozyme） 具有催化功能的RNA，其与相应mRNA结合后能发挥酶活性，将mRNA降解。 反义脱氧寡核苷酸，ODN 核酶 2.1.1.4.3 RNA干扰 概念：短的双链RNA (dsRNA) 导入细胞，可以使同源mRNA发生特异性的降解，从而阻断相应基因的表达。 特点 高度的序列专一性 高效性 易操作性 2.1.2 间接策略 导入与致病基因无直接联系的治疗基因 免疫基因治疗 分子化疗 特异性细胞杀伤 2.1.2.1 免疫基因治疗 将抗体、抗原或细胞因子的基因导入疾人体内，改变病人免疫状态，达到预防和治疗疾病的目的。 细胞因子基因治疗 IL-2、IL-4、IL-1、IL-6、IL-7、IL-12、 INF-γ、TNF-α、G-CSF、GM-CSF 免疫增强基因疗法 MHC I类抗原、共刺激分子 肿瘤DNA疫苗疗法 癌胚抗原（CEA）制备的肿瘤DNA疫苗 2.1.2.2 分子化疗 自杀基因疗法： TK基因、CD基因 化疗保护性基因治疗： MDR基因 药物增敏基因治疗： 钙调素基因 自杀基因 + 病毒载体 转染 重组载体 药物前体 无毒 Gene→酶→ ↓ 　　　　 药物复合物 有毒 细胞死亡 2.1.2.2.1 自杀基因疗法 自杀基因（suicide gene)，前体药物酶转化基因。 自杀基因