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微生物检测基础 广东省微生物研究所 广东环凯微生物科技有限公司 2010年3月 一．什么是微生物？ 病毒 没有细胞结构的专性寄生的大分子生物。如流感病毒、肝炎病毒（人体病毒），鸡瘟病毒、口蹄疫病毒（动物病毒），烟草花叶病毒、番茄丛矮病毒（植物病毒），噬菌体（细菌和放线菌病毒）等。 细菌 单细胞原核生物，一般在普通光学显微镜（油镜）下放大一千倍以上并染色才能清楚看见其个体。如人体肠道内的大肠杆菌、粪链球菌，用于酿醋的醋酸杆菌，使牛奶变酸的乳酸杆菌，生产味精的谷氨酸短杆菌，生产淀粉酶的枯草杆菌等。 酵母菌 单细胞真菌，最低等的真核生物。一般用高倍镜（400～600倍）观察其个体细胞形态。如面包酵母、酿酒酵母、红酵母等。 霉菌 真核生物，单细胞或多细胞丝状真菌 可用低倍或高倍镜观察其形态。如酿制小曲酒的根霉、制豆腐乳的毛霉、生产葡萄糖的曲霉菌、生产青霉素的青霉等。 蓝细菌（蓝绿藻） 原核微生物，单细胞或细胞聚合体。 支原体、衣原体、立克次氏体 单细胞，介于细菌与病毒之间的一类原始而小型的原核微生物。 微细藻类 单细胞藻类。如红藻、绿藻、小球藻等。 原生动物 单细胞，无真正细胞壁。 如变形虫、吸管虫、草履虫等。 二．微生物的特性 主要有四个方面 种类多 分布广 繁殖快 易变异 1．种类多 到目前为止，人们已认识的微生物已有10多万种。 2．分布广 微生物因其形体微小，重量轻，故可以随着风和水流到处传播。 岩石、土壤、海洋、湖泊、河流、大气。 动物、植物、人体表面及与外界相通的腔、道。 3．繁殖快 微生物惊人的生长繁殖速度是其他任何生物都望尘莫及的。一般细菌的世代时间为几十分钟到一百多分钟。在最适宜的条件下，人们最熟悉的大肠杆菌每13～20min就可分裂出新的一代。 4．易变异 微生物容易发生变异的主要原因是个体多为单细胞或结构简单的多细胞，甚至非细胞结构，因而在受到外界物理或化学因素影响后，很容易引起细胞内的遗传物质发生突变，结果导致遗传性状，包括形态或生理表型上的变异。微生物易变异的另一个原因是细胞增殖速度快，细胞数量多，因而尽管其自发突变率很低，也会造成在短时间内产生较多的变异后代。 三．常见微生物的  形态结构 四．实验室微生物的培养 生长培养基 实验室中细菌通常生长（培养，cultured）在摇瓶、瓶子或称作发酵罐的大培养容器液体培养基中或在圆的、通常为塑料、灭菌碟子培养皿的固体培养基中。 培养基的性质取决于微生物的天然环境和微生物生长的营养要求。 分离大量微生物用液体培养基， 固体培养基用于个别细菌的分离和保存。 限定培养基或合成培养基 天然培养基 天然培养基含有不确定的成分如蛋白胨（大豆粉酶消化液）和提供足够营养成分的酵母提取物（氨基酸、维生素、糖和碱基），适合广泛范围微生物的生长。 天然培养基如营养肉汤（NB）和胰胨、豆胨肉汤（TSB）是实验室中常规用的细菌培养基，特别对生长要求还未确定的细菌生长使用。 常用血液作培养基的附加成分分离人类病原菌，由于它提供许多难养的人类病原菌生长的基本营养，如链球菌。特殊的选择培养基和鉴别培养基经常用于分离特定的微生物类群，尤其在医院的实验室中。 选择培养基与鉴别培养基 设计这些培养基是为选择特定类群的微生物或鉴别两种菌种时用。 选择培养基含有抑制非目的细菌生长的成分，鉴别培养基是添加某种营养物或／和化学物质，促进所要的微生物生长，使在鉴别培养基平板上两种不同的微生物的菌落可以区分开来。 生长的环境条件 温度 氧浓度 PH 水活度 温度 嗜冷微生物适合于－10℃生活的细菌，最适生长温度在20℃左右。嗜温微生物生长温度在15～45℃之间，最适生长温度在37℃左右的细菌。嗜热微生物生长温度在30～75℃之间，最适生长温度在55℃，在100℃以上温度生长，称为嗜高热微生物。 氧浓度 根据细菌对氧要求的不同分为好氧菌，厌氧菌，包括专性厌氧菌、兼性厌氧菌、严格厌氧菌和耐氧菌 微好氧在正常大气氧浓度20﹪情况下就受到损伤，只能在更低的氧浓度下才能存活。 pH值 嗜碱菌（alkaliphiles）：生长在高pH（8.5～11.5）的微生物。 嗜酸菌（acidophiles）：生长在低pH（0～5.5）中的微生物。 水活度 像所有生物一样，微生物对周围环境的渗透压是敏感的。低渗透压时，水将聚集于细胞内，高渗透压时水逸出。 五．微生物的生长 1．细菌以二等分裂方式（1→2→4）分裂，细菌的生长为指数生长。群体细胞数目加倍所需的时间为倍增时间（td）。 细菌典型生长曲线 ? log10