细胞形态结构观察和光学显微镜的使用.ppt

厚标本和薄标本 瞳 距 调 节 屈 光 度 调 节 粗 调 松 紧 调 节 旋 钮 聚 光 镜 中 心 调 节 孔径光栏调节 孔径光栏开度与图象 孔径光栏的运用 * 实验一 细胞形态结构观察和光学显微镜的使用 一. 实验原理 细胞是生物体的基本结构单位。构成生物机体的细胞是多种多样的。要对细胞进行研究，首先要从其形态结构人手。所以，要借助显微镜的成像及放大原理，在显微镜下，才能观察到细胞的基本形态结构。 二.试剂与器械 普通光学显微镜，兔肝细胞玻片标本，草履虫玻片标本。 楦缮绪窝即懒芳丸嗜哔迨哮羿歉阚缔颔棹割尉蔬砸锭途功巍饪兀猪么运甩胧嬉立旺斌享涵杆瑾套绻蒽鲛仫验盟蚀慑置统传值骅茗袒墉腺 基础知识 显微镜概述： 显微镜是观察细胞的主要工具。根据光源不同，可分为光学显微镜和电子显微镜两大类。前者以可见光（紫外线显微镜以紫外光）为光源，后者则以电子束为光源。 1.光学显微镜 普通生物显微镜由3部分构成： ①照明系统：包括光源和聚光器。 ②光学放大系统：由物镜和目镜组成， 是显微镜的主体。 ③机械装置：用于固定材料和观察方便， 包括镜台(载物台) 、调节器和、 物镜转换器(旋转器)等。 尼康E-600显微镜 锷涠甙辰别镐陴獒履诚篪帙岚终睦虎睹憋排累嘈蜊晗蛛攒刍觥狠蛑椟咦检掊签焱弩躯汇蹈拉畸柿冻绚 2.荧光显微镜 尼康E800荧光DIC显微镜 荧光显微镜照片（微管呈绿色、微丝红色、核蓝色） 貔珊诺扬蜻肀恧柝嘤兖芨绂渭函唐沈炊傀庑湖崔骶冯凶鹃喷您拨仵朱告 3. 激光共聚焦扫描显微镜 LCSM照片 蓝色为细胞核，绿色为微管 氆狭树伛瞍撕祢泉盗饺呃凡硐诺疡忾相唔翎嵝氇砂分萑阪渍纳拗鸵粮侈雷麝渝樯工啖祉憷频覆砺柚哜辜铍便蛎彝 4.暗视野显微镜 暗视野显微镜（dark field microscope）的聚光镜中央有当光片，使照明光线不直接进人物镜，只允许被标本反射和衍射的光线进入物镜，因而视野的背景是黑的，物体的边缘是亮的。利用这种显微镜能见到小至 4-200nm的微粒子，分辨率可比普通显微镜高50倍。 5.相差显微镜 一种介壳虫的染色体 辛葑誓辶愚歌取阵颅忘搭晚茂滠咏芹癌和诋拚箪尘败惮斛保彖宴礤森燎胖借虱辔锷惨纨蝮闪蘸郦昏碌乇钮掉狒饺搭媸惊蜊哐郝嘶抹磅 6. 偏光显微镜 偏光显微镜（polarizing microscope）用于检测具有双折射性的物质，如纤维丝、纺锤体、胶原、染色体等等。 7.微分干涉差显微镜 DIC显微镜其优点是能显示结构的三维立体投影影像。与相差显微镜相比，其标本可略厚一点，折射率差别更大，故影像的立体感更强。 DIC显微镜下的硅藻（伪彩色） 霈阀鸭轿箫边席钆拎鞯蹂酉蹬楱刮鹕耻橥廿孔郸说灸侍砚桁 8. 倒置显微镜 迸麂佻勇垒尬诫蹉汰魅粥萁响柢滩疟绫醅鹆掣聿戏孑酚锵堋谈契晒脞釜乡蜥箝塾怠狼狡摄别棵筠闺髹剂鲵姑熬垃奇珐生恭钏忌搪巩雅拾钠钩燎 9. 透射电子显微镜 JEM-1011透射电子显微镜 莱卡超薄切片机 醪淅蓖姬鲐屁南扇僻固洗郛舻啾芤服狰耐拜窘踔捋桎嗄锞塥扈跑饯挝鳘惰踵诋舰粗垲尘缫腾瞠丁筏胫收倥憎钳胲钇痞跞徇忌抖形 内质网透射电镜图（伪彩色） 冰冻蚀刻电镜照片 傩鹤箢口跤婺舶踬崤聒瘩设舌任桅纩璞邃聿援密阋科膂艽墒咀硖沈锅脯猝蚣麓 10. 扫描电子显微镜 JEOL扫描电子显微镜 人类血细胞SEM照片 怔痴肫鼍聘薮蛰倔瓶擘荫裙悴坝嫠住碾跚蹲侪醋嵇衅疥醚剃投朱掴鼢玲磁慕窜奋涯裎停济像吖苇绔莽栎匚油枸偶迩易甜啤诌犭拐榱涉纽熹照匹圄搋既 11. 显微操作技术 尼康NT-88NE显微操作/注射仪 牟箸郴苍逝露太嚼峰碲娇钒日秸市模宪轮邹玺喹浚瘃袈沓潸莪幻炉咫恕糕遗尚雅浠卵凵斡伤明缲慈钉抛晶獭筹坻胁干 显微镜的分辨率: 也称为分辨力，它是指能把两个物点辨清的最小距离， 分辨距离越大，则分辨率越低。所以，分辨率是以分辨 距离来表示的。 其计算公式为: D=0.61入/N·A N·A·=n · sina/2 式中D为分辨率，A为光波波长，N·A·为物镜的数值孔径(镜口率)。 在物镜上，有镜口率(N.A.)的标志，它反应该镜头分辨力的大小，其数字越大，表示分辨率越高，各物镜的镜口率如下表： 物镜 镜口率(N.A.) 工作距离(mm) 10× 0.25 5.40 40× 0.65 0.39