细菌感染的检查与防治原则.ppt

第8章: 细菌感染的检查 方法与防治原则 Diagnosis and control for bacterial infection 悬滴法 靛基质试验 基因芯片（microarray chip） 获得性免疫产生的方式 主动免疫 自然免疫 患病、隐性感染 人工免疫 疫苗、类毒素 被动免疫 自然免疫 胎盘、初乳 人工免疫 抗毒素、丙球 人工免疫 基本概念：人工方法给机体接种疫苗、抗血清、淋巴因子等，使机体获得特异性免疫力。 常用方法：包括：人工主动免疫，人工被动免疫，过继免疫。 生物制品：用于人工免疫的疫苗、类毒素、免疫血清、细胞制剂以及诊断用品等的生物性制剂。 疫苗：是利用微生物及其代谢产物，经过人工减毒或灭活或基因工程等方法方法制成，用于预防疾病的自动免疫制剂。 第一代疫苗： 活疫苗 、死疫苗 第二代疫苗： 亚单位疫苗、基因工程疫苗 第三代疫苗： 核酸疫苗 细菌感染的特异性预防 一、人工主动免疫:将疫苗或类毒素接种于人体 （一）疫苗:死疫苗.减毒活疫苗.亚单位疫苗.重组载体疫苗.基因工程疫苗.核酸疫苗 （二）类毒素 二、人工被动免疫:注射含有特异性抗体的免疫血清 或纯化免疫球蛋白抗体，或细胞因子等免疫制剂. 抗毒素 血清丙种球蛋白 其他免疫制剂：IFN-γ，CSF等。 较高， 维持3~5年甚至更长 较低， 维持数月~2年 免疫效果 不易保存 回复突变 易保存，约1年 高 保存及有效期 安全性 量较小，1次 量较大，2~3次 接种剂量与特点 活减毒株 死，强毒株 制剂特点 活疫苗 死疫苗 区别点 死疫苗与活疫苗的区别 * * 病原菌的检查程序 直接涂片镜检 初步诊断 分离培养 生化试验 血清学试验 动物试验 药物敏感试验 明确诊断 其他检测法 抗原检测 （一）标本的采集和运送原则 避免杂菌污染 运送注意保存 不同期不同标本 用抗菌药物以前 采集病变明显部位 标本必须新鲜 第一节 细菌感染的检查 胆囊标本：在外科胆囊摘除手术中，采集胆囊炎患者的胆囊和胆石标本。 （二）细菌分离培养与鉴定 形态学检查: 形态与染色性具有特征的病原菌可直接染色镜检 直接涂片镜检 不染色法： 悬滴法,压滴法 暗视野显微镜、相差显微镜 染色法 革兰染色 Gram stain 抗酸染色 acid-fast stain 荧光显微镜 镜检 革兰阳性菌 革兰阴性菌 淋病患者尿道分泌物直接涂片镜检 2.分离培养(isolation and cultivation): 诊断的金标准，是最可靠的传统诊断技术。 病原菌的分离培养：菌落 大小 形态 颜色 表面性状 透明度 溶血性 血琼脂平板上分离的菌落 取单个菌落，可获得细菌 的纯培养物。 3.生化试验: 针对一个细菌菌落或纯培养物进行鉴定。 生化反应 糖发酵试验 H2S试验 枸橼盐利用试验 4.血清学试验:用已知抗体检测未知细菌抗原，进行群和型的鉴别。 最简易的方法有玻片凝集等试验。 玻片凝集 5.动物实验 常用动物 　小鼠　豚鼠　家兔 接种途径 　皮内 皮下　腹腔　静脉　 　脑内　鼻腔　灌胃　 豚鼠：适用于白喉棒状杆菌、钩端螺旋体、结核分枝杆菌、恙虫病立克次体等病原体的分离培养或毒力检测。 6.药物敏感试验 方法 纸碟法、试管法、小杯法和凹孔法 最低抑菌浓度（MIC) 最低杀菌浓度(MBC) （三）病原菌抗原的检测: 用已知抗体检测未知抗原 EIA 酶免疫技术 协同凝集试验 SPA IF 免疫荧光技术 CIE 对流免疫电泳 免疫印迹技术 WB ELISA direct indirect Fluorescence Microscopy （四）检测病原菌核酸 分子生物学技术 molecular biological techniques 1,核酸杂交(nucleotide hybridization) 2,多聚酶链反应 (polymerase chain reaction: PCR):一种无细胞的分子克隆技术，能在体外将一个基因或一段DNA 序列经过多次循 环的DNA复制，在数小时内扩增上百万倍。既便于基因诊断，又利于 研究。 3,基因芯片(gene chips) PCR仪 DNA的PCR扩增 产物电泳结果