[高二理化生]微生物的实验室培养新课.ppt

听写： 1、乳酸菌的代谢类型？产乳酸的原理？ 2、亚硝酸盐转变为亚硝胺的条件？ 3、向泡菜坛坛盖边沿的水槽中注满水的目的？ 4、测定亚硝酸盐含量的原理？ 5、测定亚硝酸盐的操作步骤？ 6、在什么腌制条件下容易造成细菌大量繁殖，使亚硝酸盐含量增加？ 7、氯化镉与氯化钡的作用? 8、氢氧化铝乳液的作用？ 培养基的配制原则 ①目的要明确：根据培养的微生物种类、培养的目的等确定培养基的类型和配制量。 ②营养要协调：培养基中各种营养物质的浓度和比例要适宜。 ③pH要适宜：细菌培养基pH中性或偏碱性，霉菌培养基呈酸性。 思考3 ①溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热? ②加琼脂的目的是什么? 思考4 ①在灭菌前, 用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？ ②培养皿能否用高压蒸汽灭菌？ 平板划线法 ①将接种环在酒精灯火焰上灼烧直至烧红。 ②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。 ③将菌种试管口通过火焰达到消灭试管口杂菌的目的。 ④将冷却的接种环伸入到菌液中取出一环菌种。 ⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。 ⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环伸入平板内划3～5条平行线，盖上皿盖，不要划破培养基。 ⑦灼烧接种环，冷却后从第一区划线末端开始向第二区域内划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将第五区的划线与第一区划线相连。 ⑧将平板倒置放在培养箱中培养。 平板划线时不能划破培养基，为什么？ 一旦划破，会造成划线不均匀，难以达到分离单菌落的目的； 二是存留在划破处的单个细胞无法形成规矩的菌落，菌落会沿着划破处生长，会形成一个条状的菌落。 系列稀释操作 101 102 103 104 105 106 (1)将分别盛有9mL水的试管灭菌并编号。 (2)用移液管吸取1mL培养的菌液，注入第二支试管中，轻压橡皮头，吹吸三次使之充分混匀。 (3)从101倍稀释的试管中吸取1mL稀释液，注入第三支试管中，重复步骤2，直至到第六支试管。 涂布平板操作 (1)将涂布器浸在盛有70％的酒精的烧杯中。 (2)取少量菌液（不超0.1mL），滴加到培养基表面。 (3)将沾有酒精的涂布器在火焰上引燃，火熄后冷却8～10s。 (4)用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。 稀释涂布平板法获取的菌落 * 专题2 :微生物的培养与应用 一、培养基作用、种类 二、无菌技术 三、制备牛肉膏蛋白胨培养基 四、纯化大肠杆菌 主要内容 课题1 微生物的实验室培养 微生物的实验室培养条件： （1）为培养的微生物提供合适的营养和环境条件 （2）确保其他微生物无法混入 研究和应用微生物的前提 防止杂菌入侵，获得纯净的培养物 一、培养基 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养基质称培养基 一般的培养基均需要 碳源、氮源、无机盐和水等（含C、N的有机物既是异养型微生物的碳源也是氮源） 培养基还需要满足微生物生长对 pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 培养基的基本成分 牛肉膏蛋白胨培养基 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。 1000ml牛肉膏蛋白胨培养基的配方 H2O 定容至1000ml Nacl 5g 蛋白胨 10g 牛肉膏 5g 琼脂20.0g 分析营养构成？各成分主要提供何种营养成分 液体培养基：用于工业生产 固体培养基：（一般用试管或培养皿盛装，在液体培养基的基础上再添加凝固剂琼脂。）用于菌种分离、鉴定菌落 培养基的种类 1、按物理状态分： 2、按功能分： 选择培养基：加入某种化学物质，从众多微生物中分离出所需微生物 鉴别培养基：加入某种试剂，鉴别不同种类的微生物 加入青霉素的培养基: 不加氮源的无氮培养基: 不加含碳有机物的无碳培养基: 分离金黄色葡萄球菌 几种选择培养基举例： 分离酵母菌、霉菌等真菌 分离固氮菌 分离自养型微生物 加入唯一碳源为纤维素的培养基 分解纤维素的细菌 加入高浓度食盐的培养基: 二、无菌技术 无菌技术泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法技术。 获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，无菌技术就是防止杂菌污染的操作技术。 消毒 1、无菌技术的种类 灭菌 使用较为温和的物理和化学方法（酒精、紫外线）来杀死部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子。 对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁消毒； 将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌； 接种的过程要在酒精灯火焰附近进行。 避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品接触 使用较为强烈的理化因素杀死物体