创新试验教学课程设置简介.PDF

附件 3 创新实验教学课程设置简介 根据创新人才培养的技术定位和本科生开展创新实验的实际情况，现已开出以实验仪 器技术为基础的 13 个系列创新实验课程，涉及 45 个单项实验，用于对进入基地学生进行集 中培训。另外，对生物技术、临床病理、医学检验等专业本科生附加了细胞工程学、中药生 物技术学、医学实验器材相关的生物安全技术（GMT、SLT ）等课程。这些课程实验同时也 作为学生立题、选择技术时参考: 实验一、全血细胞 DNA 快速提取、扩增与检测 通过该实验了解 DNA 提取、扩增的基本技术步骤，掌握紫外分光光度法测定核酸浓度、 纯度的原理、意义和操作方法。 ①基因组 DNA 酶解及酶解片断的琼脂糖凝胶电泳。了解限制性内切酶的特性，掌握琼 脂糖凝胶电泳分离技术的实验原理及应用。 ②聚合酶链式反应。掌握聚合酶链式反应（PCR ）的原理及实验设计，熟悉操作方法及 主要影响因素的控制，掌握引物的设计原理及引物设计方法。 实验二、生物样品的制备和分离 如何选择适当的方法进行生物样品的制备和分离是生物学实验成败的关键因素，本实验 目的是使学生全面了解生物样品制备和前处理等一系列生物技术，基本掌握重要仪器设备的 正确使用和维修保养，重点掌握与基础实验相关的一些常用技术。 ①使用电动组织匀浆器和超声细胞粉碎仪处理样品并检测。 ②不同过滤和超滤方法的使用，采用离心浓缩和冷冻干燥技术处理不同的样品并比较。 ③不同类型离心技术在生物实验中的应用（如细胞浆、细胞核、膜蛋白分离的密度梯度 超速离心）。 实验三、细胞培养技术 细胞培养技术是现代生物学实验的一项常规技术，目的是使学生能够熟练进行有关细胞 学实验的一些操作技术，基本掌握 CO2 细胞培养箱、倒置显微镜等器材的正确使用和常规 维护保养，重点掌握无菌操作技术。 ①结合不同类型培养箱和超净工作台的使用，强调无菌环境的质量控制。 ②培养基的选择与制备。 ③倒置显微镜的正确使用和保养，掌握相差环的调节，细胞形态观察和照像。 ④细胞的原代培养和传代培养的方法。 ⑤细胞计数和细胞活力的检测。 ⑥细胞的冻存和复苏技术。 ⑦实验室生物安全技术。 实验四、形态学系列实验技术 ①组织切片的制作、观察 通过对新鲜标本和石蜡标本的切片及 H.E 染色，使学生掌握冰冻切片机、石蜡切片机、 干烤箱、孵箱、显微镜等常用形态学设备的操作方法及使用注意事项。 ②组织切片的显微镜观测、数字 CCD 成像和显微图像分析 掌握显微照像、数字 CCD 成像的基本操作步骤。了解显微图像分析中常用的处理和分 析方法，常用参数的意义。 实验五、免疫荧光与组化学 了解免疫荧光组织化学、荧光显微镜、细胞显微光度分析、激光扫描共聚集显微镜的 原理及应用范围。掌握免疫荧光和组化学标本制作过程，光学显微镜及荧光显微镜的使用。 ①组织、细胞免疫荧光切片的制备（直标法和间标法）。 ②荧光显微镜的使用和显微荧光图像的采集、分析（图像质量控制）。 ③激光共聚焦显微镜的三维图像重建。 实验六、实验核医学系列实验技术 以放射性核素125 32 3 I 、 P 、 H 标记为实验基础的同位素检测技术： ①放射性核素示踪技术实验；液闪技术测定实验；体外翻译实验。 ②放射性核素 125I 标记技术实验。 蛋白质或酶纯品的制备；Iodogen 法标记 125I；Sephadex G25 柱层析分离；测定各分离 组分 cpm 数；绘制分离曲线。 本实验适用标记抗原，抗体和酶类，用于微量的放射免疫测定或放免测定试剂盒的研 制。 ③放射性核素 32 32 P 标记技术实验：酶纯品的制备；酶催化法将 P 标记到底物；电泳分 离；放射性自显影或 cpm 计数定量测定。 本实验适用于蛋白激酶（如蛋白激酶 C ，PKC ）类测定，核酸标记的缺口平移，体外 转录和 Southern blot, Northern blot 等。 ④ 3 3 H 标记技术实验：细胞培养； H-dTR 掺入培养；沉淀