[理化生]22土壤中分解尿素的细菌的分离与计数.ppt

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[理化生]22土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

说明设置重复组的重要性。 第一位同学只涂布了一个平板,没有设置 ,因此结果不具有说服力。 第二位同学考虑到设置 的问题,涂布了3个平板, 但是,其中1个平板的计数结果与另2个 ,说明在操作过程中可能出现了错误,因此,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。 这个实例启示学生,在设计实验时,一定要涂布至少 个平板,作为 ,才能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时,一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致,结果不一致,意味着操作有误,需要重新实验。 说明设置重复组的重要性。 第一位同学只涂布了一个平板,没有设置重复组,因此结果不具有说服力。 第二位同学考虑到设置重复组的问题,涂布了3个平板, 但是,其中1个平板的计数结果与另2个相差太远,说明在操作过程中可能出现了错误,因此,不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。 这个实例启示学生,在设计实验时,一定要涂布至少3个平板,作为重复组,才能增强实验的说服力与准确性。在分析实验结果时,一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致,结果不一致,意味着操作有误,需要重新实验。 (二)设置对照 一是由于土样不同,二是由于培养基污染或操作失误。究竟是哪个原因,可以通过实验来证明。 一种方案是可以由其他同学用与A同学一样的土样进行实验, 如果结果与A同学一致,则证明 ;如果结果不同,则证明A同学 。 另一种方案是将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为 对照,以证明培养基是否受到 。 设置对照 设置对照的主要目的是排除 组中 因素对实验结果的影响,提高实验结果的 。 (二)设置对照 一是由于土样不同,二是由于培养基污染或操作失误。究竟是哪个原因,可以通过实验来证明。 一种方案是可以由其他同学用与A同学一样的土样进行实验, 如果结果与A同学一致,则证明土样不同;如果结果不同,则证明A同学培养基污染或操作失误。 另一种方案是将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养,作为空白对照,以证明培养基是否受到污染。 设置对照 设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响,提高实验结果的可信度。 土壤中某样品细菌的分离与计数 实验的具体操作步骤 1.土壤取样? 从肥沃、湿润的土壤中取样。先铲去表层土3 cm左右,在距地表约3-8cm的土壤层取样,将样品装入事先准备好的信封中。 2.制备培养基? 准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基将菌液稀释相同的倍数,在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目,因此,牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照,用来判断选择培养基是否起到了选择作用。由于初次实验,对于稀释的范围没有把握,因此选择了一个较为宽泛的范围:稀释倍数为103~107。每个稀释度下需要3个选择培养基,1个牛肉膏蛋白胨培养基。 3.微生物的培养与观察? 将10 g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中,充分摇匀,吸取上清液1 mL,转移至盛有9 mL的生理盐水的无菌大试管中,依次等比稀释至107稀释度,并按照由107~103稀释度的顺序分别吸取0.1 mL进行平板涂布操作。按照浓度从低到高的顺序涂布平板,不必更换移液管。 将涂布好的培养皿放在30 ℃温度下培养。随着培养时间的延长,会有不同的菌落产生。比较牛肉膏培养基和选择培养基中菌落的数量、形态等,并做好记录。 4.细菌的计数? 当菌落数目稳定时,选取菌落数在30~300的平板进行计数。在同一稀释度下,至少对3个平板进行重复计数,然后求出平均值,并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。 [二]样品的稀释P24 [三]微生物的培养与观察p24 [一]无菌操作 1、取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要 。 2、应在 称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中,塞好棉塞。 3、在 土壤溶液的过程中,每一步都要在 操作。 [二]做好标记 注明 种类、培养 、平板培养样品的 等。 [三]规划时间 [一]无菌操作 1、取土用的小铁铲的盛土样的信封在使用前都需要灭菌。 2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中,塞好棉塞。 3、在稀释土壤溶液的过程中,每一步都要在火焰旁操作。 [二]做好标记 注明培养基种类、培养日期、平板培养样品的稀释度等。 [三]规划时间 1 对照的培养皿在培养过程中没有菌落生长,说明培养基没有被杂菌污染。 牛肉膏培养基的菌

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