饲料中沙门氏菌的监测概况及常规检测技术应用演示幻灯片.pptx

饲料中沙门氏菌监测情况及常规检测技术的应用; 常规沙门氏菌检测技术的应用;背景;沙门氏菌;DANIEL ELMER SALMON, (1850-1914)美国兽医微生物和病理学家。是美国授予的第一位兽医学博士。1884年任美国农业部畜牧局首任局长。他首次从病猪中分离出猪霍乱沙门氏菌。在医学微生物中通用的沙门氏菌一词，就是为纪念他而以他的名字命名的。;沙门氏菌（Salmonella）;;沙门氏菌在不同选择琼脂平板上的菌落特征;沙门氏菌的危害;; 据调查，沙门氏菌是美国食物中毒致死的主要原因。美国每年大约报告40000例沙门氏菌感染病例。但实际的感染人数可能要达20倍以上，因为许多轻型病人可能未确诊，据不完全统计，每年大约1000人死于急性沙门氏菌感染。 ;沙门氏菌对动物的危害;（1）急性败血症 多见于断奶前后（2~4月龄）仔猪，主要由猪霍乱沙门氏菌引起。发热，拒食，耳根，胸前，腹下等处皮肤出现紫斑，后期见下痢，呼吸困难，咳嗽跛行，经1~4d死亡。病死率可达20％~40％。 （2）亚急性和慢性 表现为：体温升高，畏寒；结膜炎， 顽固性下痢，伴以消瘦，脱水而死；部分病猪在病中后期皮肤出现弥漫性湿疹。 ; （1）雏鸡感染：引起败血症，可造成大批死忙 ；病鸡表现虚弱，口渴，食欲不振，腹泻，发育迟滞等。 （2）成年鸡：最常见产蛋量降低或停止。另外可引起卵巢炎，可在卵黄内带菌而传给幼雏。 ;（1）犊牛：体温升高，呼吸困难；排出血丝粪便；病期延长时，腕和跗关节可能肿大，有时伴有支气管炎和肺炎症状。 （2）成年牛：常有高热，昏迷，食欲废绝，呼吸困难，体力迅速衰竭；怀孕母牛多数发生流产。;传播途径; 危害程度分类 中华人民共和国卫生部《人间传染的病原微生物名录》; 加强饲料的卫生管理，防止沙门氏菌的污染，不仅是发展畜禽生产的需要，也是减少人类感染沙 门氏菌、预防食物中毒的一个重要环节。; 国外沙门氏菌污染情况;常规检测技术的应用;常规沙门氏菌检测技术;国内现行标准;传统检测方法;传统检测方法原理;主要培养基、试剂、血清;主要仪器设备与材料;;TSI生化试验;生化鉴定;生化鉴定试剂套装;结果判定; ???他商品化生化鉴定系统;VITEK;商品化生化鉴定系统;API 20E;API 20E;BD PhoenixTM 100;血清学鉴定;分子生物学方法;;PCR技术原理;;主要仪器设备、培养基、试剂;DNA模板制备方法;PCR扩增;PCR结果分析及判定;实时荧光PCR原理;;主要仪器设备、培养基、试剂;模板DNA的制备;实时荧光PCR扩增;样品Ct值≤35时，报告沙门氏菌筛选阳性； 样品Ct值介于35-40之间，重复一次，如果Ct值＜40，且曲线有明显的对数增长期，报告沙门氏菌筛选阳性，否则，报告未检出； 样品Ct值≥40时，报告未检出。 筛选阳性的样品按SN0170的规定进行确证，以确证结果为准。;其他分子生物学技术;免疫学方法;现行标准;技术原理;主要仪器设备、培养基、试剂;检测步骤;结果判定;其他免疫学检测技术;国标方法优缺点;实时荧光PCR法 具有高度的灵敏性、特异性和精确性，与PCR方法相比，具有操作简单、所需时间短等优点，但成本较高。;THANK YOU!