[化学]Hela细胞培养.pdf

细胞培养基本技术 细胞培养的基本概念 传代培养 细胞在培养器皿中生长一定时间后，被分开接种到新的培养器 皿中。培养细胞的“一代”，不表示细胞分裂一次，而是指培养细 胞从接种到再次转移培养的过程。在一次传代培养中，细胞能倍增 3-6次。 原代培养 取自体内新鲜组织并置于体外条件下生长的细胞在传代之前 称为原代培养。一旦进行传代培养，便不再是原代培养，而改称为 细胞系。 细胞培养 使用单个细胞悬液 3 3 组织培养 使用组织块（0.5～1 mm ）或薄片（0.2 mm ） 器官培养 使用器官的一部分或整个器官 原代培养的新生大鼠心肌细胞,细胞形 人平滑膜细胞培养24h后贴壁生长， 态以梭性、多角形为主 平滑膜组织中主要有两种细胞：成纤 维细胞样形态呈树枝状贴壁生长；巨 噬样平滑膜细胞为单核/巨噬样细胞 形态，分裂增殖较慢（箭头处） 原代培养细胞的培养周期 初代 无限细胞系 培养 有限细胞系 18 指 16 指 数 数 细 14 第 转化 细 胞 一 胞 数 12 次 老化 数 量 传 量 10 代 8 死亡 6 传代 接种培养 间隔 4 0 2 4 6 8 10 12 14 16 周 原代培养期 传代培养期 衰退期 细胞系（cell line）： 原代培养物成功传代后，则称之为细胞系。如细胞系的生存期有限，则称之为有 限细胞系（finite cell line）；已获无限繁殖能力可以持续生存的细胞系，称为连续细 胞系或无限细胞系（infinite cell line）。无限细胞系大多已发生异倍化，具异倍体核 型，有的可能已成为恶性细胞，因此本质上是发生转化的细胞系。无限细胞系有的只 有永生性（或不死性），但仍保留接触抑制和无异体接种致癌性；有的不仅有永生性， 异体接种还有致瘤性 。 细胞株（cell strain/stable cell line）： 通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称 为细胞株。细胞株的特殊性质或标志物必须在整个培养期间始终存在。由原细胞株进 一步分离培