[化学]分析化学第10章 液相色谱法.ppt

色谱通论液相色谱 §1 概述 §2 色谱法基本原理 §3 发展概况 (自学) §4 柱色谱 §5 薄层色谱法 §6 薄层扫描法 §7 纸色谱法 本章小结 §1 概述 色谱法 (chromatography) 定义：利用各组分物理化学性质的不同，在流动相流经固定相时，由于各组分在两相间的吸附、分配或其它亲和力的差异而产生不同速度的移动，最终达到分离的目的。 分离基础：差速迁移 (例:赛跑) 特点：效率高，灵敏度高，能把性质相近的物质彼此分开，适合于干扰组分存在的混合物的分离分析。 二、分类 (一) . 以两相所处的状态分类： 流动相 固定相 类型 mobile phase stationary phase 液 固 L-S色谱 液 液 L-L色谱 气 固 G-S色谱 气 液 G-L色谱 (二). 按分离机理分类： (1). 吸附色谱: 利用吸附剂表面对不同组分吸附力不同而分离。 (L～S 色谱 g～S色谱) 固定相为固体吸附剂的色谱 (2). 分配色谱: (L～L , g～L). 利用各组分在两相间分配系数不同进行分离。 (3). 离子交换: 利用不同组分对离子交换剂亲和力不同分离。 (4).分子排阻色谱: 利用某些凝固对不同组分因分子大小不同而阻止作用不同，进行分离。 (三). 按操作类型分类： 柱色谱(column chromatography)：气相、高效、超临界流体、经典柱等等。 平面色谱(plynar chromatography) ：薄层、纸色谱. 逆流分配：属液相色谱，目前已很少使用。 二. 分配系数与保留行为的关系： 1. 分配系数：柱中分配平衡后，组分在固定相与流动相 中的浓度之比。 K =CS / Cm S－固定相 m－流动相 ※K与T有关。 对于不同的分离机理，K的含义不同: 吸附色谱 称 吸附系数 分配色谱 称 分配系数 离子交换色谱 称 离子交换系数 分子排阻色谱 称 分子排阻系数 2. 保留时间：从进样到某组分色谱峰峰顶的时间间隔， 为该组分的保留时间（tR ）。 保留体积：从进样到某组分色谱峰峰顶所需流动相的体积 为该组分的保留体积VR。 死时间：不保留组分(不与固定相作用的组分)的保留时间 为死时间t0(即流动相的保留时间)。 死体积：V0 保留时间是色谱的定性参数，同样组分，在同样色谱条件 下，tR 应相同。 3. tR 与K 的关系： 设R为一个分子在流动相中出现的几率, 则固定相中1－ R 。 ( 1- R‘) / R = CsVs/CmVm = KVs/Vm 整理后得: 1/ R = 1+ KVs/Vm 即有: —— 色谱基本关系式之一 在一定的色谱条件下, t0、Vs、Vm为定值, tR与K呈线形关系。 组分的K大, tR大,后洗脱(后出峰)。 组分的K小, tR小,先洗脱(先出峰)。 混合物中各组分K相差愈大,各组分愈易彼此分开。 K与组分、流动相、固定相、的性质和温度有关。而在色谱 条件一定时, tR主要取决于组分的性质。因此, tR是定性参数。 §4 柱色谱 column chromatography 有吸附柱色谱、分配柱色谱、离子交换柱色谱等。 一. 液–固 吸附柱色谱: 固体吸附剂