[医学]第五章 中药指纹图谱.ppt

第五章 中药指纹图谱Fingerprints of Chinese Materia Medica 同一个成药，疗效一致吗？ 中药材不同品种、产地、加工： 不同厂家： 不同工艺： 不同辅料： 含量一致，疗效一致？ 不同厂家银杏提取物的色谱指纹图谱 2010版药典丹参提取物指纹图谱 一、中药指纹图谱概述 中药指纹图谱的含义 中药经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标示该中药特征的共有峰的图谱。 中药指纹图谱的特性 稳定性（重现性） 指纹图谱研究的主要目的 对中药质量控制的补充和提高。 控制原料、中间体、成品的一致性，控制工艺，减少批间差异。 相同处方，不同工艺，疗效？ 指纹图谱中应包含的信息 对于中药材和中药饮片：种的共性，用药部位的共性，产地的个性，采收期、炮制方法的个性信息。 对于半成品和中药制剂：原药材（甚至辅料）的信息；工艺信息；关联信息等。 药效信息：不仅能反映真伪，还能反映质量优劣。 二、指纹图谱研究手段 色谱技术 光谱技术　UV　IR 波谱技术　MS NMR X-射线衍射法 分子生物学技术 TLC举例：区分不同品种 TLC举例：监控工艺 HPCE指纹图谱 红外光谱图 中国药典规定：小蓟在开花时采。 根据1384cm-1处吸收峰的有无，可以鉴别其采集时间是否正确。 三、指纹图谱构建程序 试验需考察的内容 ? 液相色谱 ● 色谱柱：比较试验加以选择 流动相：至少用三种不同组成比较 适宜的柱温和检测波长 方法学验证 稳定性试验：样品溶液的稳定性 精密度试验：仪器的精密度 重复性试验：处理、分析方法的重复性 注意事项 HPLC和GC指纹图谱：记录时间一般为1小时； TLC指纹图谱：须提供从原点至溶剂前沿的图谱； 光谱方法制定指纹图谱：必须按各种光谱的相应规定提供全谱。 对于化学成分类型复杂品种，必要时可建立多张指纹图谱。 四、指纹图谱分析步骤 标定共有指纹峰，确定参照峰 五、指纹图谱的评价 要求“准确的辨认”而不是“精密的测量”； 比较供试品与对照品的色谱指纹图谱要求“相似”而不是“相同”。 评价色谱比较的结果，是根据其模糊属性，着眼于宏观的规律性的特征分析，即着重辨认完整色谱的“图貌”，而不是求索细枝末节。 指纹图谱相似度评价 直观分析比较：看一看 量化数据比较：算一算（重叠率，相似率等） 计算机辅助相似度评价 重叠率和相似率计算 例：银杏提取物EGB761 EGB761中含总黄酮成分24%，萜类内酯6%，原花青素类7.0% ，羧酸类成分13.0%，儿茶素类2.0%，非黄酮类苷类20%，高分子化合物4.0%，无机物5.0%，水分溶剂3.0%，其他3.0%。 有害成分银杏酸类≤5ppm 银杏叶提取物指纹图谱 银杏叶提取物及制剂指纹图谱 小结 中药指纹图谱是一种量化的鉴别手段。 指纹图谱必须符合整体性、特征性、稳定性、关联性的基本要求。 指纹图谱与药效相结合才有现实意义。 特征指纹峰（有效成分）的含量测定结合指纹图谱是理想的质量控制模式。 复习思考题 中药指纹图谱有哪些应用？ 中药指纹图谱的建立有哪些步骤和程序？ 如何分析和评价中药指纹图谱？ 参考资料 中华人民共和国药典2010版 《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求(暂行)》国药管注[2000]348号 《中药、天然药物注射剂基本技术要求》国食药监注[2007]743号 流动相 1 流动相 2 流动相 3 15 20 25 30 35 203 210 236 254 365 非共有峰总面积不得大于总峰面积的10％ 计算各共有峰的相对保留时间、峰面积比 给出标准（对照）指纹图谱及数据 与标准指纹图谱相比 重叠率= 共有峰数×2 指纹图谱峰数+供试品峰数 ×100% 特征指纹峰相似率= 指纹图谱中特征指纹峰面积 供试品图谱中特征指纹峰面积 ×100% 芦丁 * * * Southern Medical University Southern Medical University * * * * 沈群sq@ 中医药学院中药制剂教研室 原儿茶醛 迷迭香酸 丹酚酸B 血脂康胶囊 整体性（模糊性） 特征性 在规定的方法与条件下，不同的操作者和不同的实验室应能作出相同的指纹图谱 能反映中药有效部位所含大部分成分的种类，或指标成分的全部 能特征地区分中药的真伪与优劣 TLC HPLC, LC/MS GC, GC/MS HPCE, CE/MS 色谱指纹图谱 薄层色谱 薄层色谱 Thin Layer Chromatography (TLC) ●可在同板同时分析多达18个样品，时效高 ●所用的是正相展开剂，其组成变化灵活，可适应多种成分的分离 ●离线操作，即可直观比较图谱，又可扫描得到轮廓图和处理数