[医药卫生]培养细胞的观察检测方法.pdf

生物秀实验频道——生命科学实验中心 /bio101 培养细胞的观察 检测方法 组胚教研室 李雅娜 生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区 /bbs 生物秀实验频道——生命科学实验中心 /bio101 细胞的观察检测方法 培养细胞常用的染色方法 细胞生长状况有关指标的检测方法 细胞生物活性的有关化学检测方法 电子显微镜技术 生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区 /bbs 生物秀实验频道——生命科学实验中心 /bio101 一、 细胞的观察检测方法 细胞在体外培养过程中需要每天观察，以便及时 了解细胞生长状态、数量改变、细胞形态、细胞有 无移动、有无污染、培养液pH是否变酸、变黄、是 否更换等。 细胞常规检查的方法为： 肉眼观察 相差显微镜观察 生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区 /bbs 生物秀实验频道——生命科学实验中心 /bio101 生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区 /bbs 生物秀实验频道——生命科学实验中心 /bio101 肉眼观察 一般常规检查用肉眼即可观察，主要看培养 液的颜色和透明度的变化。 pH 颜色 透明度 正常 7.2～7.4 桃红色 清 、透明 酸性产物 变浅、变黄 污染 混浊 变黄←pH ↓↓ pH ↑↑→变红 生物秀论坛——学术交流、资源共享、互助社区 /bbs 生物秀实验频道——生命科学实验中心 /bio101 大多数细胞适于在pH 7.2～7.4条件下生长，低于pH 6.8 或高于pH 7.6对细胞有害，甚至造成细胞退化或死亡。细 胞对碱性不如对酸性的变化耐受，偏酸的条件比偏碱的环 境对细胞生长有利。 随细胞数量的增多、代谢加强，释放CO 增多，使pH 降 2 低。为了维持培养基恒定的pH ，多在培养基中加入磷酸 盐等缓冲剂。 羟乙基哌嗪乙硫磺酸 （Hepes）：对细胞无毒性，也不起 缓冲作用，主要作用是防止pH 迅速变动，在开瓶通气培 养或活细胞观察时能维持较恒定的pH值。 若培养瓶、瓶塞漏气，使CO 溢出，或者由于洗刷不洁、