[历史学]实验八微生物生理生化特性检测糖发酵、氨化作用、甲基红试验等.pdf

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[历史学]实验八微生物生理生化特性检测糖发酵、氨化作用、甲基红试验等

实验八 微生物生理生化特性检测 (糖发酵、氨化作用、甲基红试验等) 本次实验内容: 一 糖发酵试验 二 好气氨化作用试验 三 IMViC与硫化氢试验 一 糖发酵试验 1 目的要求 2 基本原理 3 试验材料 4 操作步骤 1 目的要求 了解糖发酵的原理。 掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 巩固微生物接种技术 2 基本原理 不同细菌对糖的分解利用能力存在较大 差异,且产物不同,是常用的鉴别微生物的 生化方法。有些细菌能分解某种糖产生有机 酸和气体;有些细菌只产酸不产气。若产酸, 可根据培养基特定的酸碱指示剂的特征性的 颜色变化检测;若产气,可从培养基中的杜 氏小管中是否有气泡观测。 3 试验材料 培养基—— 无菌葡萄糖发酵培养基 无菌蔗糖发酵培养基 菌种—— 大肠杆菌 枯草杆菌 4 操作步骤 在试管外壁标明发酵培养基名称和接种细菌菌名。 取葡萄糖发酵培养基试管3支,分别接种大肠杆菌、枯草 杆菌,第三支不接做对照;取蔗糖发酵培养基试管3支,分 别接种大肠杆菌、枯草杆菌,第三支不接做对照。 将接种的和做对照的6支试管放置28~30℃培养2~3天。 观察各试管颜色变化及杜氏小管中是否有气泡。 供试糖 葡萄糖 蔗糖 大肠杆菌 产酸 产气 枯草杆菌 产酸 产气 对照 产酸、产气 注:记录生长情况用符号表示:   — :不生长; +:生长差; ++:生长一般; +++:生长良好 二 好气氨化作用试验 1 目的要求 2 基本原理 3 试验材料 4 操作步骤 1 目的要求 了解好气氨化作用的原理 掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 巩固微生物的接种技术 2 基本原理 不同微生物对含氮化合物分解能力及代 谢途径、最终产物不尽相同,这些特征性 生化反应可作为菌种鉴定的重要依据。微 生物可分解含氮有机物,最终产生氨气。 以酸碱指示剂试纸检测。 3 试验材料 培养基—— 牛肉膏蛋白胨液体培养基 菌种—— 土壤颗粒 大肠杆菌 枯草杆菌 4操作步骤 (1)取牛肉膏蛋白胨液体培养基四支,分别接种土壤颗粒, 大肠杆菌、枯草杆菌,余下一支不接种作为空白对照,在每 支试管口悬挂一经无菌水湿润的石蕊试纸,并加好试管塞。 (2)将已经接种的培养管置于28--30℃培养5--7日。 (3)结果检测:  观察各管石蕊试纸变色及培养液浑浊情况,用奈氏试剂检 测是否有氨产生。 好气氨化试验 接种 土壤颗粒 大肠杆菌 枯草杆菌 空白对照 检测 菌样 项目 培养液 浑浊程度 石蕊试纸 变色程度 三IMVIC与硫化氢试验 1 目的要求 2 基本原理 3 试验材料 4 操作步骤

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