[学科竞赛]生物竞赛 细胞工程.ppt

植物细胞工程的基本技术 二. 植物体细胞杂交技术 1.植物体细胞杂交就是将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并且把杂种细胞培育成新植物体的方法。 用培养的人细胞构建人造皮肤 动物细胞培养的定义： 动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 2、动物细胞培养条件： 2、动物细胞培养条件： 动物细胞培养条件： 动物细胞融合的概念 动物细胞融合也称细胞杂交，是指两个或多个动物细胞形成一个细胞的过程 二、单克隆抗体 单克隆抗体： 如何大量生产单克隆抗体？ 利用淋巴细胞产生抗体的功能 利用肿瘤细胞无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和肿瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 从培养液中提取单克隆抗体 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 ——仙台病毒 ——电激 ——聚乙二醇 B淋巴细胞与抗体的关系： 　①B淋巴细胞受抗原刺激后，增殖分化成浆细胞，可以产生抗体。 　②动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 　③每一个B淋巴细胞只能产生一种抗体 　 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。 特点：特异性强、灵敏度高 * *  专题2 细胞工程 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 什么叫细胞工程？ 1、植物组织培养技术 2、植物体细胞杂交技术 离体的植物器官、组织或细胞 愈伤组织 根、芽 植物体 脱分化 再分化 植物组织培养过程 发育 愈伤组织： 细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的、无定形状态的具有分生能力薄壁细胞； 脱（去）分化： 已经分化的细胞，经过诱导后，失去其特有的结构和功能而变成未分化的细胞。 再分化： 脱分化生产的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官的过程。 这样经过脱分化和再分化，离体的植物细胞、组织或器官就形成了一个新的植株。 因为不同种生物之间存在着生殖隔离，所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。 这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗？为什么？ 你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合，遇到的第一个障碍是什么？ 细胞壁 原生质体如何融合的呢？ 人工诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法两大类：物理法是利用离心、振动、电刺激等促使原生质体融合；化学法是用聚乙二醇(PEG)等试剂作为诱导剂诱导融合 。 1 植物体细胞杂交过程示意图: 2 操作过程包括： 原生质体的制备 原生质体融合 杂种细胞筛选 杂种细胞培养 杂种植株再生 杂种植株鉴定 所采用技术的理论基础 植物细胞工程 通常采用的技术手段 植物组织培养 植物体细胞杂交 植物细胞的全能性 小结 一、植物繁殖的新途径 1.微型繁殖 (1)微型繁殖技术：快速繁殖优良品种的植物组织培养技术。因此，也叫做快速繁殖技术。 (2)特点:保持优良品种的遗传特性; 高效快速地实现种苗的大量繁殖. 2.作物脱毒 （1）材料：无病毒的茎尖； （2）脱毒苗：切取茎尖进行组织培养获得。 2.2 动物细胞工程 专题2 细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体技术 细胞核移植 动物细胞工程常用技术 1、动物细胞培养的过程 培养液 胰蛋白酶 动物 组织块 （剪碎） 单个细胞 细胞 悬浮液 原代培养 部分细胞无限传代 动物细胞培养不能最终培养成生物体 传代培养 1、动物细胞培养的过程 ⑴、无菌、无毒的环境 对培养液和培养用具进行无菌处理；培养液中添加一定量的抗生素；定期更换培养液以清除细胞代谢产物。 ⑵、营养 葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐（包括各种微量元素）、动物血清或血浆等。 ⑶、温度和PH 36.5 ±0.5℃； PH为7.2－7.4。 ⑷、气体环境： O2和CO2（95%空气和5%CO2 ） 二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 动物核移植是将动物的一个细胞的细胞核，移如入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体,即克隆动物。 核移植 胚胎细胞核移植 体细胞核移植（难度高） 1、体细胞核移植的过程 高产奶牛（供体）细胞核 去核MⅡ期卵母细胞 物理或化学方法激活 注入 重组胚胎 移