[医药]儿童过敏性紫癜相关基因表达谱研究.ppt

儿童过敏性紫癜相关基因表达谱研究 江西省儿童医院肾内科 傅 睿 李 娟 2011-09-23 研究背景 过敏性紫癜(HSP)是儿童时期最常见的以小血管炎症为主要病变的系统性血管炎，以皮肤紫癜、胃肠道症状、关节肿痛、肾脏损害为主要临床表现 HSP发病率有逐年增多趋势 皮疹反复出现 暴发性、坏死性皮肤紫癜 肾脏损伤 严重的胃肠道大出血 新发病例严重肾脏损伤者逐渐增多 紫癜性肾炎占儿童继发性肾脏疾病第一位 儿童时期终末期肾脏病的主要原因 HSP患儿肾脏是否受累及受累程度是决定其预后的最主要因素 病因及发病机制仍未完全阐明 临床上尚缺乏有效的治疗措施 加强对过敏性紫癜发病机制、特别是分子发病机制的研究以试图寻找更科学、更有效的治疗方法来控制其进一步发生与发展成为广大儿肾工作者努力的方向 许多研究者、临床工作者均在努力寻找能够减少HSP疾病发生、导致肾损害的各种因素，以期能指导临床治疗，改善HSP的预后 目前的研究多集中在单一细胞因子或者单一基因在过敏性紫癜发病及进展中的作用和关系上 血清中IL-6、TNF-α水平能够反映HSP患儿的疾病严重程度 Lin CY, Yang YH, Lee CC,et al. Thrombopoietin and interleukin-6 levels in Henoch-Sch?nlein purpura[J]. J Microbiol Immunol Infect, 2006;39(6):476-82 HSP 患儿血清VCAM-1水平与HSP 患儿的疾病严重程度有关 傅睿，胡宝金，等.可溶性血管细胞粘附分子1（sVCAM-1）在紫癜性肾炎发病中的作用探讨[J].中国免疫学杂志，2003；19（2）：129－131. 基因多态性及表达异常与HSP的易感性、肾损伤进展、预后有相关性 人类白细胞抗原(HLA)-DQAI、HIA-B35、 HLA –DRBI 肾素-血管紧张素系统(RAS)基因 细胞毒性T细胞相关蛋白4基因 家族性地中海基因 C4基因、PAX2 只是从某一方面反映了其中某些单一因素在过敏性紫癜发病中的作用 只是针对一个或几个基因进行研究，无法达到对基因网络化、高通量分析的要求 我科开展的课题 血管细胞粘附分子-1(VCAM-1)在紫癜性肾炎发病中的作用及其临床意义的研究 巨噬细胞移动抑制因子在紫癜性肾炎发病中作用及意义 巨噬细胞移动抑制因子-173G/C基因多态性与紫癜性肾炎发病的关系 足细胞蛋白Podocalyxin在紫癜性肾炎发病机制中的研究 松弛素与儿童过敏性紫癜复发及肾损害关系的研究 免疫吸附血液灌流技术在儿童重症过敏性紫癜中的临床应用 问 题 目前研究手段的局限性及单一方面性 参与HSP 发生、发展过程中的主要基因 导致HSP 患儿肾损伤的基因 目前并不十分清楚，需要更先进的研究方法 基因芯片技术提供研究平台 将几千个基因特异的探针或其cDNA片断固定在载体上 能够高通量、准确、快速同时进行成千上万条基因表达的测定 对来源于不同个体、不同组织、不同细胞周期、不同发育阶段、不同分化阶段、不同病变、不同刺激下的细胞内的mRNA或逆转录产物cDNA进行检测 大规模对这些基因表达的个体特异性、组织特异性、发育阶段特异性、分化阶段特异性、病变特异性、刺激特异性进行综合分析和判断 疾病的诊断、鉴别诊断、治疗药物选择、预后判断 基因芯片技术在肾脏疾病诊断和治疗中的应用 儿童肾病综合征基因表达谱分析 系统性红斑狼疮 Alport综合征 UUO大鼠肾间质纤维化的分子机制 糖尿病肾病大鼠 研究内容及目的 利用基因芯片技术检测HSP患儿外周血、HSPN患儿肾组织基因表达谱，以正常儿童外周血及正常肾组织基因表达谱为对照，对差异表达基因进行生物信息学分析，筛选出HSP患儿疾病发生及肾损伤相关基因，以探讨HSP发生、发展的分子机制 研究对象 病例组：HSP患儿6例，根据有无尿改变分为非肾损伤组(NHSPN)3例，肾损伤组(HSPN)3例。 对照组：选取年龄、性别与病例组相匹配的3例健康体检儿童外周血；正常肾组织1例来自肾肿瘤切除术后远离肿瘤的正常肾组织 。 HSP诊断符合《实用儿科学》第7版中HSP的诊断标准。HSPN诊断符合中华医学会儿科分会肾脏病学组制定的诊断标准。 研究结果与讨论 总RNA质量检测 芯片数据评估 芯片结果 总RNA质量检测 总RNA经生物分光光度计检